0 Acadbmie des sciences / Elsevier, Paris Sciences mkdicales / Medical sciences Fragmentation radio-induite de I’ADN kvalu4e par immunomarquage anti poly(ADP-ribose) dans les CHO. ftalonnage par 6lectrophorPse en champ puls6 &d&on-induced DNA breaks detected by immunoh5elling ofpoly(ADP-ribose) in CHO cells. Standardization by p”lsed-Jield gel electrophoresis Pascale Varleta*, Nathalie Bidonb*, Georges No61b, Gilbert DeMurciaC, Jean Salamerod, Dietrich Averbeckb** a Laboratoire d’anatomo-pathologie, h6pital Sainte-Anne, 1, rue Cabanis, 75014 Paris, France b Section de recherche, lnstitut Curie, UMR 218 du CNRS, LCR no 1 du CEA, 26, rue d’Ulm, 75231 Paris cedex 05, France ’ fcole superieure de biotechnologie de Strasbourg, UPR 9003 du CNRS, 67400 Illkirch-Graffenstaden, France d Section de recherche, lnstitut Curie, UMR 144 du CNRS, 75005 Paris, France (Requ le 14 octobre 1997, accept@ aprgs rkvision le 16 f&rier 1998) Abstract - The poly (ADP-ribose) polymerase is an ubiquitous nuclear protein capable of binding specifically to DNA strand breaks. It synthesizes ADP-ribose polymers proportionally to DNA breaks. The actual method of reference to determine DNA double strand breaks is pulsed-field gel electrophoresis, but this requires many cells. It thus appeared of interest to use poly (ADP- ribos)ylation to follow and estimate y-ray-induced DNA fragmentation at the level ofisolated cells after y-irradiation in Chinese hamster ovary cells (CHO-Kl). Th e results obtained by the immu- nolabelling technique of ADP-ribose polymers were compared to those obtained by pulsed-field gel electrophoresis. They show that poly (ADP-ribos)ylation reflects the occurrence of radiation- induced DNA strand breaks. A clear relationship exists between the amount of ADP-ribose poly- mers detected and DNA double strand breaks after y-irradiation. (0 Academic des sciences / Else- vier, Paris.) immunolabelling / ADP-ribose polymers / double strand breaks I pulsed-field gel electrophoresis RCsumb - La poly (ADP-ribose) polym&ase est une proteine nucleaire ubiquitaire capable de se fixer specifiquement au niveau des cassures de I’ADN. Elle catalyse la synthPse de polymPres d’ADP-ribose, proportionnellement au nombre de ces I&ions. Pour dbterminer le nombre de cassures double brin de I’ADN, la methode de rbf&ence est I’electrophor&e en champ pulse, mais cette technique n&essite un grand nombre de cellules et ne permet pas une ktude ,?II’&helle cellulaire individuelle. II a done paru intbressant d’utiliser la poly (ADP-ribos)ylation afin de suivre et d’estimer la fragmen- tation radio-induite de I’ADN par des rayons y dans les cellules d’ovaires de hamster chinois (CHO-Kl). Les r&ultats obtenus par la technique d’immunomarquage de poly- Note communiqube par Raymond Latarjet. * Les deux auteurs ont autant particip6 a la rbalisation de ce travail ** Correspondance et tires a part C. R. Acad. Sci. Paris, Sciences de la vie / Life Sciences 1998.321,313-318