Copyright©2011. Jurnal Perikanan (Journal of Fisheries Sciences) All Right Reserved 70 Jurnal Perikanan (J. Fish. Sci.) XIII (2): 70-77 ISSN: 0853-6384 IDENTIFIKASI MOLEKULER DENGAN TEKNIK PCR-RFLP LARVA PARASIT Anisakis spp (Nematoda: Anisakidae) PADA IKAN TONGKOL (Auxis thazard) DAN KEMBUNG (Rastrelliger kanagurta) DARI PERAIRAN MAKASSAR MOLECULAR IDENTIFICATION OF Anisakis spp (Nematode: Anisakidae) FROM FRIGATE TUNA (Auxis thazard) AND INDIAN MACKEREL (Rastrelliger kanagurta) OF MAKASSAR WATERS Hilal Anshary Jurusan Perikanan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan Universitas Hasanuddin Jl. Perintis Kemerdekaan km. 10 Tamalanrea, Makassar 90245 E-mail: hilal_an@yahoo.com/hilalanshary@unhas.ac.id Abstrak Beragam spesies ikan laut dikenal sebagai inang perantara dari berbagai spesies parasit, termasuk nematoda Anisakis yang merupakan agen penyebab Anisakiasis pada manusia. Anisakiasis dapat terjadi pada manusia setelah memakan ikan mentah atau setengah matang yang terinfeksi oleh Anisakis sp. Di Indonesia, khususnya di Sulawesi Selatan, informasi tentang Infeksi Anisakis ikan sering kali diabaikan dan tidak terdokumentasi dengan baik. Oleh karena itu, penelitian ini dimulai dengan mengumpulkan larva nematoda dari dua spesies ikan (Auxis thazard dan Rastrelliger kanagurta). Organ tubuh yang diperiksa meliputi rongga perut, organ internal dan jaringan otot. Larva nematoda yang diidentifikasi secara morfologis menunjukkan Anisakis spp kemudian dipisahkan untuk identifikasi secara molekuler lebih lanjut. Parasit difiksasi dalam etanol 70% dan dilanjutkan dengan PCR menggunakan primer ITS-1, 5.8S dan ITS-2 regions. Secara morfologi, Anisakis spp. dapat dibedakan dengan Anisakidae lain oleh adanya ventriculus yang jelas terlihat padaAnisakis spp. di bawah mikroskop stereo. Anisakis tipe I dan tipe II dibedakan oleh adanya mukron yang hanya terdapat pada Anisakistipe I dan tidak adanya di Anisakis tipe II. Spesies yang diidentifikasi menggunakan PCR-RFLP menunjukkan bahwa nematoda yang ditemukan pada ikan tongkol dan ikan kembung adalah Anisakis Typica. Kata kunci: Anisakis typica, Auxis thazard, Rastrelliger kanagurta, PCR-RFLP, Makassar Abstract Different species of marine fishes are known as intermediate host of various species of parasites, including Anisakis nematode, the causative agent of human Anisakiasis. Anisakiasis may occurin human after consuming raw or undercooked fish infected by Anisakis sp. In Indonesia, particularly in South Sulawesi, information about Anisakis Infection of fish is negligible and not well documented. Therefore, this research was initiated by collecting nematode larvae from the two species of fish (frigate tuna Auxis thazard and Indian mackerel Rastrelliger kanagurta). Organs of fish examined were body cavity, internal organs, and muscle. Nematode larvae were morphologically identified and those belonging to Anisakis spp, were separated for further molecular identification. Parasites were fixed in 70% ethanol, and PCR was performed using primers on ITS-1, 5.8S and ITS-2 regions. Morphologically, Anisakis spp can be distinguished with other Anisakidae by the presence of prominent ventricle clearly seen under stereomicroscope in Anisakis spp. Anisakis type I and type II are differentiated by the presence of mucron in Anisakis type I and absence in Anisakis type II. Species identification using PCR-RFLP showed that Anisakis type I found in frigate tuna and Indian mackerel were Anisakis typica. Key words: Anisakis typica, Auxis thazard, Rastrelliger kanagurta, PCR-RFLP, Makassar Full Paper Pengantar Dalam perdagangan produk perikanan secara global, masalah keamanan pangan merupakan salah satu isu penting menyangkut kualitas produk. Produk perikanan dipersyaratkan bebas dari bahan-bahan berbahaya termasuk diantaranya terbebas dari patogen yang dapat menyebabkan penyakit pada manusia (zoonosis). Pada produk perikanan, isu keamanan pangan yang disebabkan oleh patogen antara lain berupa bakteri, virus, jamur dan parasit.