Arch. Insect Biochem. Physiol. 2019;e21591. wileyonlinelibrary.com/journal/arch © 2019 Wiley Periodicals, Inc. | 1 of 14 https://doi.org/10.1002/arch.21591 DOI: 10.1002/arch.21591 RESEARCH ARTICLE Biochemical characterization of digestive membrane‐associated alkaline phosphatase from the velvet bean caterpillar Anticarsia gemmatalis Gabriela da Silva 1 | Luís Felipe Costa Ramos 1 | Henrique dos Santos Seckler 1 | Fabio Mendonça Gomes 2 | Juliana Reis Cortines 3 | Isabela Ramos 4 | Cristiane Dinis Anobom 1 | Ednildo de Alcantara Machado 2 | Danielle Maria Perpétua de Oliveira 1 1 Laboratório de Bioquímica Estrutural de Proteínas, Departamento de Bioquímica, Centro de Ciências Matemáticas e da Natureza, Instituto de Química, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro CEP, Brazil 2 Laboratório de Bioquímica de Insetos e Parasitos, Instituto de Biofísica Carlos Chagas Filho, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro CEP, Brazil 3 Departamento de Virologia, Centro de Ciências da Saúde, Instituto de Microbiologia Paulo de Góes, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro CEP, Brazil 4 Laboratório de Bioquímica de Insetos, Centro de Ciências da Saúde, Instituto de Bioquímica Médica, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro CEP, Brazil Correspondence Danielle Maria Perpétua de Oliveira, Laboratório de Bioquímica Estrutural de Proteínas, Departamento de Bioquímica, Instituto de Química, Centro de Ciências Matemáticas e da Natureza, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro CEP 21941‐909, Brazil. Email: danioliveira@iq.ufrj.br Funding information Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico; Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro; Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), Grant/Award Number: 475166/2011‐6; Fundação de Amparo à Pesquisa Carlos Chagas Filho (FAPERJ), Grant/Award Number: E‐26/110.760/2011 Abstract In Brazil, the use of transgenic plants expressing the insect‐ toxic Bacillus thuringiensis endotoxin has been successfully used as pest control management since 2013 in transgenic soybean lineages against pest caterpillars such as Helicov- erpa armigera. These toxins, endogenously expressed by the plants or sprayed over the crops, are ingested by the insect and bind to receptors in the midgut of these animals, resulting in disruption of digestion and lower insect survival rates. Here, we identified and characterized a membrane‐ associated alkaline phosphatase (ALP) in the midgut of Anticarsia gemmatalis, the main soybean defoliator pest in Brazil, and data suggested that it binds to Cry1Ac toxin in vitro. Our data showed a peak of ALP activity in homogenate samples of the midgut dissected from the 4th and 5th instars larvae. The brush border membrane vesicles