INTRODUCCIÓN La salinización del sustrato afecta al crecimiento de las plantas de dos formas: por una parte, la presencia de sal reduce la absorción de agua por parte de la planta, lo que conlle- va una reducción en la tasa de creci- miento y es lo que se conoce como efecto osmótico del estrés salino. Por otra parte tiene lugar, de forma más lenta, la acumulación de iones en las hojas, donde pueden llegar a alcan- zar concentraciones tóxicas (Gómez- Cadenas y col. 1998). En cítricos, a diferencia de lo que ocurre en otras especies, el ión tóxi- co es el Cl - (Moya y col. 2002, 2003; López-Climent y col. 2008) y las diferencias en la tolerancia a la sali- nidad observadas entre los diferen- tes portainjertos de cítricos se deben, fundamentalmente, a su capacidad para excluir estos iones cloruro (Moya y col. 2003), aunque el mante- nimiento del buen funcionamiento del sistema fotosintético es importante (López-Climent y col. 2008). Algunos genotipos, como manda- rino Cleopatra (MC) se consideran tolerantes a la salinidad, mientras que otros como citrange Carrizo (CC) o citrumelo CPB4475 (Cit) son sensi- bles a este estrés. La salinidad causa daños en las hojas, disminu- ción en la tasa fotosintética neta, en la transpiración y en la conductancia estomática y hace que se active la maquinaria antioxidante (Arbona y col. 2003). Además, provoca cam- bios en los niveles endógenos de diferentes fitohormonas. Es sabido que el ácido abscísico (ABA) y el eti- leno están implicados en la respues- ta de los cítricos al estrés por salini- dad (Gómez-Cadenas y col. 1998). Rosa M. Pérez-Clemente ● Almudena Montoliu ● María F. López-Climent Vicent Arbona ● Carlos de Ollas ● Vicente Vives ● Aurelio Gómez-Cadenas Departamento de Ciencias Agrarias y del Medio Natural. Universitat Jaume I. Campus Riu Sec 12071 Castellón. Email: aurelio.gomez@uji.es UTILIZACIÓN DEL CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES IN VITRO PARA EL ESTUDIO DE LA RESPUESTA DE LOS CÍTRICOS AL ESTRÉS SALINO. Resumen Este trabajo describe la puesta a punto de un sistema in vitro para el estudio de la toxicidad del NaCl en tres genotipos de cítricos, evitando el filtro de iones que constituye la raíz. Los cultivos se establecieron a partir de plantas de man- darino Cleopatra, citrange Carrizo y citrumelo CPB4475 cultivadas en inverna- dero. Se ensayaron diferentes concentraciones de NaCl y se seleccionó 60 mM como tratamiento salino para los diferentes experimentos. Los brotes de todos los genotipos estudiados acumularon concentraciones similares de iones cloru- ro cuando se cultivaron desprovistos del sistema radicular y mostraron los mis- mos daños foliares. No se observó incremento en la concentración de malon- dialdehido (como indicador del daño oxidativo) en ninguno de los genotipos y todos ellos mostraron patrones similares de señalización hormonal, con inde- pendencia de su tolerancia o sensibilidad cuando se cultivan en campo. El sis- tema in vitro descrito se postula como una herramienta útil para el estudio de los procesos bioquímicos implicados en la respuesta de los cítricos al estrés salino. Abstract In this work, an in vitro experimental system has been developed to study the toxic effect of NaCl on three citrus genotypes, avoiding the ion filter that repre- sents the root system. Cultures were established from greenhouse growing plants of Cleopatra mandarin, Carrizo citrange and citrumelo CPB4475. Several salt concentrations were tested and 60 mM NaCl was selected as saline treat- ment. Shoots from all studied genotypes accumulated similar levels of chloride when cultured without roots and exhibited similar leaf damage. No increases in malondialdehyde levels (as a measure of oxidative stress) were observed in any genotype and similar patterns of hormonal signalling were exhibited in the three genotypes, despite their different tolerance under field conditions. The in vitro culture system has been proved as a useful tool to study biochemical processes involved in the response of citrus to salt stress. CULTIVO TEJIDOS VEGETALES in vitro/ RESPUESTA ESTRÉS SALINO LEVANTE AGRICOLA 1 er Trimestre 2011 /13