Morphometric and Molecular Study of Fasciola Isolates from Ruminants in Iran İran’da Geviş Getiren Hayvanlarda Fasciola Izolatlarının Morfometrik ve Moleküler Çalışması ABSTRACT Objective: The purpose of the present study was morphometric and molecular characterization of Fasciola isolates from ruminants in Iran. Methods: Flukes were collected from the livers of 54 naturally infected sheep and cattle. The proportion of body length to width (L/W) of each fresh fluke was measured using a digital caliper. We employed receiver operating characteristic (ROC) curve analysis to explore the reliability of L/W for differentiating the two species. Polymerase chain reaction (PCR)-sequencing was performed on ribosomal Internal Tran- scribed Spacers (ITS) and mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 (cox1) genes. The sequences were then analyzed and phylogenetic relationships were investigated. Result: Forty-eight out of 54 isolates (88.9%) were identified as F. hepatica and four isolates (7.4%) as F. gigantica. All the sheep isolates were F. hepatica, while 4 out of 10 cattle were infected with F. gigantica. The morphometric study revealed an L/W ratio of 1.2 to 6.5 in Fasciola isolates with significantly higher L/W ratio in F. gigantica (p<0.00). According to the ROC curve analysis, the L/W value of 3.55 was regarded as the critical value to discriminate between the two species. Conclusions: Findings of the present study indicate the presence of both Fasciola species in southeastern Iran. The phylogenetic analysis revealed two different clades representing F. hepatica and F. gigantica. The two isolates in this study were described as Fasciola sp. The mitochondrial DNA of these isolates were similar to F. hepatica, while their ITS fragments were identical to F. gigantica. Keywords: Fasciola, Morphometry, Iran, cox1, ITS Received: 05.02.2017 Accepted: 05.10.2017 ÖZ Amaç: Bu çalışmanın amacı İran’daki geviş getiren hayvanlarda Fasciola izolatlarının morfometrik ve moleküler karakterizasyonunu yapmaktır. Yöntemler: Doğal olarak enfekte olan 54 koyun ve sığırın karaciğerinden parazitler alındı. Her canlı parazitin vücut uzunluğunun genişliğine oranı (L/W) dijital kaliper ile ölçüldü. İki türü ayırt etmek için L/W güvenilirliğini bulmak için alıcı işletim karakteristik (ROC) eğrisi kullanıldı. Polimeraz zincir reaksiyon (PZR) dizilimi ribozomal iç transkripsiyonu aralayıcı (ITS) ve mitokondriyal Sitokrom c oksidaz altbirimi 1 (cox1) gen- lerinde yapıldı. Daha sonra dizilimler analiz edildi ve filogenetik ilişkiler araştırıldı. Bulgular: Elli dört izolattan 48’inin (%88,9) F. hepatica ve 4’ünün (%7,4) F. gigantica olduğu belirlendi. On sığırdan 4’ü F. gigantica ile enfekte olurken, tüm koyun izolatları F. hepatica olarak bulundu. Morfometrik çalışmada, Fasciola izolatlarında 1,2/6,5 olarak tespit edilen L/W oranı, F. gigantica izolatlarından anlamlı ölçüde daha yüksekti. ROC eğrisi analizine göre, 3,55 L/W değeri iki türü ayırt etmek için kritik değer olarak kabul edildi. Sonuç: Mevcut çalışmanın bulguları güneydoğu İran’da her iki Fasciola türünün varlığını göstermektedir. Filogenetik analiz F. hepatica ve F. gigantica’yi gösteren iki farklı türü ortaya koymuştur. Bu çalışmadaki iki izolat Fasciola sp. olarak tanımlandı. ITS fragmentleri F. gigantica ile aynı iken, bu izolatların mitokondriyal DNA’ları F. hepatica’ya benzerdi Anahtar Kelimeler: Fasciola, Morfometri, İran, cox1, ITS Geliş Tarihi: 05.02.2017 Kabul Tarihi: 05.10.2017 Cite this article as: Akhlaghi E, Mohammadi MA, Ziaali N, Baneshi MR, Nasibi S, Kamyabi H, et al. Morphometric and Molecular Study of Fasciola Isolates from Ruminants in Iran. Türkiye Parazitol Derg 2017; 41: 192-7. Elham Akhlaghi 1 , Mohammad Ali Mohammadi 1 , Naser Ziaali 2 , Mohammad Reza Baneshi 3 , Saeid Nasibi 1 , Hossein Kamyabi 2 , Sima Rostami 4 , Majid Fasihi Harandi 1 192 Original Investigation / Özgün Araştırma Address for Correspondence / Yazışma Adresi: Majid Fasihi Harandi, E.mail: majid.fasihi@gmail.com DOI: 10.5152/tpd.2017.5214 ©Copyright 2017 Turkish Society for Parasitology - Available online at www.tparazitolderg.org ©Telif hakkı 2017 Türkiye Parazitoloji Derneği - Makale metnine www.tparazitolderg.org web sayfasından ulaşılabilir. 1 Research Center for Hydatid Disease in Iran, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, İran 2 Department of Parasitology, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, İran 3 Research Center for Modelling in Health, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, İran 4 Dietary Supplements and Probiotics Research Center, Alborz University of Medical Sciences, Karaj, İran