I DENTIFICACIÓN Y A ISLAMIENTO DE P OSIBLES Legionella sp. COMO B ACTERIAS E NDOSIMBIONTES DE A MEBAS DE V IDA L IBRE J. MAURICIO M. HERRERA C., A LEJANDRA CRUZ D., y A LINA URIBE G. Carrera de Biología, Escuela Nacional de Estudios Profesionales Iztacala, Universidad Nacional Autónoma de México, Tlalnepantla, Estado de México 54090, México Versión Final: Diciembre 11, 1998 R ESUMEN. La simbiosis intracelular es un fenómeno biológico amplio e importante. Uno de los modelos in vitro mas estudiados, es el que se lleva a cabo entre bacterias Legionella y amebas de vida libre. En el presente estudio, se logró identificar y aislar bacterias endosimbiontes patógenas de amebas de vida libre, que se encuentran en los sedimentos del agua de charco. Experimentos de identificación, como son el tamaño, la dependencia a L-cisteina, la no-termofilia, la tinción de Gram, la morfología colonial y sobre todo la capacidad de infectar y multiplicarse en amebas de vida libre, nos permiten promover un estudio mas a fondo sobre la caracterización filogenética de estas bacterias, ya que pudiera tratarse de alguna especie de Legionella no estudiada previamente. También en este estudio, se describen algunas metodologias útiles para la identificación y aislamiento de bacterias endosimbiontes de amebas de vida libre. Estas técnicas pudieran resultar de gran ayuda para futuros estudios dirigidos a bacterias que poseen alguna relación simbiótica con amebas o algún otro protozoario. I NTRODUCCIÓN La Simbiosis celular puede definirse como la asociación física a largo plazo (en el tiempo geológico), de organismos que son miembros de diferentes especies. La Teoría de la Endosimbiosis propone que las células eucariotes derivaron de comunidades bacterianas altamente integradas; aunque no directamente. En esta propuesta, dos o más tipos de simbiontes coevolucionaron con el tiempo y se integraron en un solo organismo, con la capacidad de adquirir más simbiontes. También establece que las tres clases de organelos particulares de las células eucariotes: undulipodios (organelos de movilidad), mitocondrias (organelos transductores de energía), y plástidos (organelos de fotosíntesis) se originaron de simbiontes bacterianos (Margulis et al., 1992). Algunos organismos fagocitaron bacterias para su alimentación, pero estas bacterias sobrevivieron a la hidrólisis, comenzaron a producir o a aprovechar material, el cual era benéfico o tóxico para la célula hospedera. Al final de esta línea evolutiva se produjeron las células eucariotes tal como las conocemos. La simbiosis intracelular es un fenómeno biológico amplio e importante. Esta simbiosis conjuga diferentes genomas, lo cual puede provocar cambios genéticos, tales como la transferencia de genes, la cual es más significativa que los cambios producidos por las mutaciones o hibridizaciones (Margulis, 1981). A pesar de que las células hospederas usualmente proporcionan un refugio adecuado y proveen de los materiales necesarios, los endosimbiontes deben sobrevivir a la hidrólisis y otros procesos celulares, para poder desarrollarse dentro del hospedero (Jeon, 1995). Algunas asociaciones comenzaron como infecciones patógenas letales; tal es el caso de Amoeba proteus , especie cultivada por Jeon durante 1966 en la Universidad de Tennessee, la cual fue infectada por bacterias. Al principio, el gran numero de bacterias internas mató a casi todas las amebas, esto, debido a que estas bacterias debilitaron las enzimas digestivas de las amebas mediante la expulsión de las enzimas a través de la membrana de las vacuolas digestivas. Ya que estas bacterias no eran digeridas,