¿Histoplasmosis en España? Negativo en anticuerpos en un biólogo tras 20 años trabajando con murciélagos. Juan Quetglas Santos 1 & Maria José Buitrago Serna 2 1.-Murciélagos y Más. Espartinas, España. www.murcielagosymas.es jqmurcielagos@gmail.com . 2.- Servicio de Micología. Centro Nacional de Microbiología. Instituto de Salud Carlos III. Majadahonda. Madrid. buitrago@isciii.es LA ENFERMEDAD - Histoplasmosis La histoplasmosis es una enfermedad principalmente pulmonar de humanos y otros mamíferos causada por un hongo. La infección ocurre por inhalación de las esporas, que son fácilmente suspendidas en el aire al mover depósitos fecales secos, habiendo muchos casos en América de contagio de espeleólogos y otras personas que frecuentaban cuevas y minas con colonias de murciélagos [1]. No es posible el contagio directo entre personas [2]. La enfermedad se considera endémica de algunas regiones del África subsahariana, Asia, Australia y sobre todo América, donde está más representada [3]. (Áreas de distribución en el continente americano, figura 1). Europa no se considera zona de histoplasmosis, aunque en Italia se han descrito esporádicamente casos en el valle del Po. [ϯ], doŶde eŶ los ’60 se deteĐtó el hoŶgo eŶ el suelo [ϰ]. TaŵďiéŶ se haŶ desĐrito Đasos eŶ tejoŶes salvajes, Meles meles, centroeuropeos [5]. EL CAUSANTE - Un hongo, dos géneros. La enfermedad es causada por el hongo dimórfico Histoplasma capsulatum, (orden Onygenales , división Ascomycota). Aparece naturalmente como un saprófito del suelo en áreas relativamente cálidas y húmedas. Su desarrollo se potencia mediante material orgánico apropiado como las heces de aves o murciélagos. Presenta dos morfologías: una miceliar, con hifas, cuando crece a temperatura ambiente, (figuras 2, 3 y 4) y otra en forma de levadura, unicelular, cuando se cultiva a 37ºC, cosa que ocurre dentro de nuestro cuerpo. Este organismo pertenece a dos géneros a la vez: Histoplasma capsulatum es el anamorfo (forma de reproducción asexual) de Ajellomyces capsulatus (teleomorfo, forma de reproducción sexual). Del teleomorfo no se conoce en estado natural y sólo se ha conseguido ver en experimentos de laboratorio [6]. El código internacional de nomenclatura botánica permite ésta situación tan extraña para un mastozoólogo. Nosotros preferimos referirnos siempre a la especie como Histoplasma capsulatum. Su distribución es referida como cosmopolita [7], en contraposición con la enfermedad que se define como endémica. Los datos sobre presencia en Europa son escasos y muy dudosos. EL CASO DE ESTUDIO – VeiŶte años eŶ ĐoŶtaĐto ĐoŶ los ŵurĐiélagos… En 2013 un biólogo especializado en murciélagos sufrió durante muchos meses distintos síntomas parecidos a neumonías sin que se diera con su diagnóstico. En principio se descartaba la posibilidad de que los síntomas correspondieran a histoplasmosis porque España es considerada como zona libre de histoplasmosis y no se ha dado entre espeleólogos [2]. Pero en el sujeto afectado se daba la diferencia de que todas las expediciones a cuevas se hacían precisamente a las zonas con murciélagos, donde se permanecía durante el trabajo con éstos animales. Además el grueso del trabajo se realizó en Andalucía, donde la temperatura de las cuevas es de las más altas de iberia, facilitando el posible crecimiento del hongo que se supone termófilo. Entre 1994 y 2014 trabajó en refugios cavernícolas primero en Baleares y después en Andalucía con un pico de actividad espeleológica entre 1999 y 2007. También visitó puntualmente cuevas en La Rioja, Ávila y Marruecos. En ese tiempo también manipuló especies de murciélagos fisurículas y forestales. El conocimiento de un artículo citando H. capsulatum en una cueva de la provincia de Málaga [8] en la que también había estado el biólogo en los años 90 animó a salir de dudas y se analizó la presencia de anticuerpos en sangre, con resultado negativo. DISCUSIÓN - …siŶ ĐoŶtaĐtar ĐoŶ el patógeŶo. Queda descartado que los síntomas padecidos se debieran a un caso de histoplasmosis. Dado que se habían visitado un gran número de cuevas con guano de murciélagos, probablemente no haya Histoplasma capsulatum en las cuevas españolas o no esté muy representado, pero se requiere de un estudio ambiental para descartarlo completamente. Los datos y fotografías aportadas en el trabajo de Fernández 2009 [8] podrían ser compatibles con H.capsulatum, aunque para confirmarlo habría que comprobar que crece en forma de levadura a 37ºC y que es patógena infectando ratones, o mediante métodos de identificación molecular . Existen algunas especies de reciente descripción con los mismos hábitos guanófilos y una morfología muy similar, como Chrysosporium chiropterorum (Francia) [9] y C. speluncarum (Chequia, Eslovaquia, Rumanía) [10], aunque no son patógenos. El análisis de muestras de guano y suelos implica el trabajo en un laboratorio de nivel 3 de bioseguridad, lo que complica mucho el estudio de este hongo. El estudio de anticuerpos en grupos de riesgo como espeleólogos y quiropterólogos puede aportar pistas válidas sobre la presencia de Histoplasma capsulatum. MATERIAL Y MÉTODOS. Se tomó una muestra de suero en diciembre de 2013. La detección de anticuerpos en el suero del paciente se realizó por una técnica de inmunodifusión comercial (ID Fungal Antibody System, IMMY, EEUU,), en el Centro Nacional de Microbiología. Las técnicas de inmunodifusión se basan en identificar la reacción Ag-Ac por medio de la precipitación en un medio semisólido como el agar. El Ag y el Ac difunden hasta alcanzar la concentración óptima donde se unen y forman bandas de precipitación visibles. Son métodos inmunológicos sencillos y rutinariamente usados en el laboratorio clínico para la detección de antígenos (Ag) o anticuerpos (Ac) en una muestra biológica. Para realizar la técnica se emplearon 20 ml de suero y se siguieron las recomendaciones del fabricante. REFERENCIAS: [1] Denny G. Constantine. Health Precautions for Bat Researchers. In “Ecological and Behavioral Methods for the Study of Bats”. T.H. Kunz ed. (Smithsonian Institution Press, 1988). [2] Buitrago, M.J. & M. Cuenca-Estrella. 2011. Epidemiología actual y diagnóstico de laboratorio de las micosis endémicas en España. Enferm Infecc Microbiol Clin. Doi:10.1016/j.eimc.2011.09.014 [3] Antinori, S. 2014. Histoplasma capsulatum: More Widespread than Previously Thought. Am. J. Trop. Med. Hyg., 90(6), 2014, pp. 982–983 [4] Sotgiu, G., Mazzoni, A. Manotvani, A., Ajello, L. & Palmer, J. 1965. Histoplasma capsulatum: occurrence in soil from the Emilia-Romagna region of Italy. Science 147:624 [5] Eisenberg, T, H. Seeger, T. Kasuga, U. Eskens, C. Sauerwald & U. Kaim. 2013. Detection and characterization of Histoplasma capsulatum in a German badger (Meles meles) by ITS sequencing and multilocus sequencing analysis. Medical Mycology. May 2013, Vol. 51, No. 4 , Pages 337-344 (doi:10.3109/13693786.2012.723831) [6] Kwon-Chung, K.J. 1972. Sexual Stage of Histoplasma capsulatum. Science, New Series, Vol. 175, No. 4019 (Jan. 21, 1972), p. 326 [7] http://www.cdc.gov/fungal/diseases/histoplasmosis/causes.html [8] Fernández, J.F., Hongo Encontrado por el G.E.V. en la Cueva de Yeso III (Antequera, Málaga). Espeleo nº 21, Bio-Espeleo, 54-55, 2009. [9] Benguin, H., G. Larcher, N. Nolard & D. Chabasse. 2005. Chrysosporium chiropterorum sp. Nov., isolated in France, resembling Chrysosporium state of Ajellomyces capsulatus (Histoplasma capsulatum). Med. Mycol. 43:161-169. [10] Nováková, A. & M. Kolarik. 2010. Chrysosporium speluncarum, a new species resembling Ajellomyces capsulatus, obtained from bat guano in caves of temperate Europe. Mycol. Progress, 9: 253-260. Figura 1. Distribución de la histoplasmosis en el continente americano., principal zona de infección del planeta. Agradecimientos: A la Biblioteca Mundial de Murciélagos de Ginebra por la facilitación de bibliografía. La detección de anticuerpos se hizo en el Centro Nacional de Microbiología. Baltasar Felguera del Grupo Espeleológico Arqueológico de Campillos (Málaga) y Jose Luis Fernández han aportado sus fotos para éste poster. Figura 2. Histoplasma capsulatum . Cultivos a partir de biopsias de pesrsonas infrectadas. Foto. Maria José Buitrago. Figura 4. Hongo encontrado en la Cueva de Yesos III en Antequera Málaga. Fotos con distintos aumentos. Microconidios (a la izquierda, señalados con flechas) y macroconidios (Fotos: José Luis Fernández) Figura 3. Hongo encontrado en la Cueva de Yesos III en Antequera Málaga..Forma miceliar distribuida sobre el sustrato de guano de murciélago en el interior de la cueva. Foto de Baltasar Felguera (GEA Campillos) Panel presentado en las V Jornadas SECEMU, Alcalá de Henares, 6-7 Diciembre 2014