Patrón de Metilación génica en el cáncer de la vesícula biliar Juan Carlos Roa S * , Angélica Melo A * , Leonardo Anabalón * , Oscar Tapia E * , Xabier de Aretxabala U ** , I ván Roa E * * Departamento de Anatomía Patológica, Universidad de La Frontera, Temuco CHILE * * Departamento de Cirugía, Clínica Alemana de Santiago CHILE Resumen La metilación de la región promotora de genes es un importante mecanismo en la inactivación de genes supresores de tumores. Objetivo Analizar el patrón metilación de importantes genes involucrados en procesos carcinogenéticos de la vesícula biliar, correlacion ándolas con su expresión inmunohistoquímica, características anatomoclínicas y sobrevida de los pacientes. Material y Método Se seleccionaron 20 casos de cáncer de vesícula biliar del banco de tumores congelados. El ADN extraído fue analizado mediante el test de metilación específica por PCR para los Genes CDKN2A ( p16) , hMLH1 , APC, FHIT y CDH1 ( Caderina –E). Se obtuvo datos anatomoclínicos y seguimiento de la totalidad de los pacientes. Resultados: La totalidad de los casos correspondió a tumores avanzados (95%) histológicamente moderada o pobremente diferenciados (95%).Se observó metilación del área promotora de los genes en 5%, 20%, 30%, 40%, 65% y un patrón inmunohistoquímico alterado (PIA) en 5%, 35%, 21% ,25%, 66% para los genes hMLH1, CDKN2A, FHIT, APC y Caderina-E respectivamente. El indice de concordancia Kappa fue casi perfecto entre metilación del área promotora y PIA para los genes hMLH1 y Caderina E y substancial para APC . No se encontr ó correlación entre sobreviva y la metilación de los genes estudiados. Conclusiones: La alta frecuencia de de metilación génica (con la excepción de hMLH1) y la alta correlación de PIA y metilación del área promotora génica para los genes hMLH1, APC y Caderina E, sugieren que la metilación es un mecanismo importante en su inactivacion, jugando probablemente un rol en la tumorogénesis vesicular. Introduccion Existen escasos estudios comunicados respecto de la carcinogénesis vesicular se han enfocado a detectar la mutación de genes dominantes como K-ras ( 1 - 4 )o la inactivación de genes supresores de tumores mediante Mutación o deleción alélica( 2 , 5 - 8 ). Recientemente estudios de extensa alelotipificación cromosómica han mostrado que existen deleciones alélicas múltiples en diferentes sitios del genoma humano, sugiriendo la participación de numerosos genes supresores de tumores en esta neoplasia( 9 ). La metilación del ADN es el cambio epigenético más frecuente e importante en tumores humanos, incidiendo directamente en la inactivación de los genes supresores de tumores como mecanismo alterno a la mutación y deleción alélica, La inactivación por metilación afecta directamente procesos tan importantes como el ciclo celular, la reparación del ADN y aquellos involucrados en la invasión y metástasis. ( 10 , 11 ) En las células tumorales existe un estado de hipometilación del ADN genómico p, sin embargo, se observa hipermetilación en regiones ricas en citocinas y guaninas (islotes CpG), en las zonas que están ubicadas frecuentemente cerca o dentro de las áreas promotoras génicas, en aproximadamente la mitad de los genes humanos conocidos. ( 12 - 14 ). La hipermetilación de estas áreas produce represión transcripcional debido a un cambio en la estructura de la cromatina, que la hace inaccesible a los factores de transcripción, y de esta manera inactiva a los genes involucrados en las distintas vías carcinogenéticas. Este fenómeno ha sido reportado en varios tipos de tumores, lo que ha permitido establecer patrones específicos de metilación en diferentes subgrupos de tumores. (15 , 16 ). El adecuado entendimiento de los perfiles de metilación tumoral puede tener un impacto en importantes problemas clínicos como la detección precoz, quimioprevención, pron óstico y tratamiento de las enfermedades neoplásicas ( 10 ) Nuestro objetivo fue examinar el patrón de metilación de la región promotora de genes involucrados en distintas vías carcinogenéticas en carcinomas vesiculares avanzados, además relacionar su expresión inmunohistoquímica y algunas Página 1 de 7 7º Congreso Virtual Hispanoamericano de Anatomí a Patol ógica 30/09/2005 http://www.conganat.org/7congreso/final/vistaImpresion.asp?id_trabajo=279