Transformación de espermatogonias tipo A de ratón mediada por liposomas G. Villuendas 1 , A. Gutiérrez-Adán 1 , A. Jiménez 1 , E. Roldán 2 , B. Pintado 1 * 1 Dpto. de Reproducción Animal y Recursos Zoogenéticos, INIA, Ctra. de la Coruña, Km 5,9 Madrid 28040 (España) 2 Museo Nacional de Ciencias Naturales, CSIC. C/ José Gutiérrez Abascal, 2, 28006 Madrid (España) pintado@inia.es RESUMEN La transformación de espermatogonias indiferenciadas empieza a ser un sistema alternativo para la modifi- cación de la línea germinal animal y obtención de animales genéticamente modificados a raíz de la posibilidad de trasplante de estas células al testículo de un macho receptor de la misma o diferente especie. El desarrollo de esta metodología implica la necesidad de optimizar un sistema de cultivo in vitro que permita el mantenimiento a largo plazo de esta estirpe celular de forma indiferenciada, y también la consecución de un sistema de transfec- ción eficiente. Este trabajo explora el segundo aspecto comparando la capacidad de transfección de tres diferen- tes liposomas utilizando una construcción basada en la expresión de proteína fluorescente verde (GFP) como marcador de expresión. Nuestro estudio demuestra que es posible transfectar una población celular enriquecida en espermatogonias tipo A mediante diferentes fórmulas lipídicas (lipofectina, lipofectamina y cellfectina) con un rango bajo de citotoxicidad. Se han detectado diferencias en el nivel de expresión de GFP en las espermato- gonias transfectadas dependientes del liposoma utilizado y del tiempo post-transfección. Los porcentajes de cé- lulas transfectadas más elevados se obtuvieron con lipofectamina 48 horas después de la transfección. PALABRAS CLAVE: Espermatogonias tipo A Ratón Transfección Liposomas GFP INTRODUCCIÓN La incorporación de nueva información en el genoma animal es una de las herramien- tas más importantes desarrolladas en el campo de la Biotecnología, aunque se ha visto li- Invest. Agr.: Prod. Sanid. Anim. Vol. 16 (2), 2001 * Autor para correspondencia Recibido: 4-5-01 Aceptado para su publicación: 22-10-01