© Schattauer 2014 Tierärztliche Praxis Kleintiere 5/2014 310 Original Article Key words Virus infection, nephropathy, osteodystrophy Summary Objective: A disease is described in juvenile tortoises (Testudo graeca and Geochelone elegans) consisting mainly of a soft carapace, soft plastron and deformed skeleton. The aim of this study was to deter- mine histopathological lesions and the biological properties of the isolated viruses. Materials and methods: Clinical signs and gross pathology were determined on diseased and healthy appearing tor- toises. Paraffin sections were stained with HE, PAS and Prussian Blue and histologically examined. Terrapene heart (TH-1) cell cultures served for virus isolations from 64 tissues and 104 swabs. One isolate (isolate 1243/37 tongue) was used in neutralization tests on 19 sera. Results: Retarded growth and increasingly soft plastron and carapace were the prominent signs in diseased tortoises. Pathological lesions consisted of dilated urinary sac, enlarged kidneys and livers. Histo- pathologically, hepatic hemosiderosis, hypoplastic anaemia, conges- tive glomerulonephrosis and osteodystrophy were seen. A novel vi- rus (“virus X”) was isolated from 64 organs and 79 of 104 swabs. The isolated viruses were identified as a novel chelonid picornavirus based on cytopathic effect, resistance to chloroform and stability at low pH. Co-cultivation with 5-iodo-2’-deoxyuridine and actinomycin D did not reduce virus titres. Electron microscopically, round, non-en- veloped particles (25–30 nm) were detected. Neutralizing antibodies to the isolate 1243/37tongue were present in 17 of 19 sera from seven species of tortoises. Conclusion and clinical relevance: Nephro- pathy, osteodystrophy and virus isolations suggest a viral aetiology. Metabolic bone disease is the major differential diagnosis. Further investigations in vivo are needed to evaluate the likely effects of the picornavirus on tortoises. Schlüsselwörter Virusinfektion, Nephropathie, Osteodystrophie Zusammenfassung Gegenstand und Ziel: Beschreibung einer Erkrankung juveniler Land- schildkröten (Testudo graeca und Geochelone elegans), die klinisch mit weichem Karapax und Plastron sowie Skelettdeformationen einhergeht. Ziele waren Dokumentation histopathologischer Befunde sowie Isolie- rung und Bestimmung der biologischen Eigenschaften der Virusisolate. Material und Methoden: An klinisch gesunden und erkrankten Schild- kröten wurden klinische Symptome und pathologische Veränderungen erhoben. Histopathologisch wurden Paraffinschnitte nach HE-, PAS- und Berliner-Blau-Färbung untersucht. Terrapene-Heart(TH-1-)Zellkul- turen dienten zur Virusisolierung aus 64 Organhomogenisaten und 104 Tupferproben. In Neutralisationstests wurden 19 Serumproben adulter, klinisch gesunder Schildkröten desselben Bestands auf Antikörper ge- gen das Isolat 1243/37 Zunge untersucht. Ergebnisse: Erkrankte Schild- kröten zeigten Wachstumsverzögerung und eine zunehmende Erwei- chung von Plastron und Karapax. Pathologisch wurden ein erweiterter Harnsack sowie vergrößerte Nieren und Lebern festgestellt, histopatho- logisch hepatische Hämosiderose, hypoplastische Anämie, kongestive Glomerulonephrose und osteodystrophische Veränderungen. Ein Virus („Virus X“) wurde aus allen 64 Organ- und aus 79 der 104 Tupferproben isoliert. Der zytopathische Effekt, die Resistenz gegenüber Chloroform, die Stabilität bei niedrigen pH-Werten, die Resistenz gegenüber 5-Jod- 2’-Desoxiuridin und Actinomycin D sowie die elektronenmikroskopisch dargestellten kleinen (25–30 nm), rundlichen, unbehüllten Partikel wei- sen auf ein neuartiges, schildkrötenspezifisches Picornavirus hin. In 17 der 19 Seren ließen sich neutralisierende Antikörper gegen das Isolat 1243/37 Zunge nachweisen. Schlussfolgerung und klinische Rele- vanz: Der Nephrotropismus und der Nachweis von Nephropathie, os- teodystrophischen Veränderungen und Virämie deuten auf eine virale Ätiologie hin. Wichtigste Differenzialdiagnose ist die Osteodystrophie. Weitere In-vivo-Untersuchungen sind nötig, um die Auswirkungen des isolierten Picornavirus auf juvenile Landschildkröten zu bestimmen. Korrespondenzadresse Prof. Dr. Dr. h. c. Erhard F. Kaleta Klinik für Vögel, Reptilien, Amphibien und Fische der Justus-Liebig-Universität Gießen Frankfurter Straße 91–93 D-35392 Gießen E-Mail: Erhard.F.Kaleta@vetmed.uni-giessen.de Erweichung von Karapax und Plastron mit Skelettdeformation bei juvenilen Landschildkröten. Histopathologie und Isolierung eines neuen Picornavirus aus Testudo graeca und Geochelone elegans Tierärztl Prax 2014; 42 (K): 310–320 Received: September 24, 2013 Accepted after revision: March 20, 2014 Soft plastron, soft carapace with skeletal abnormality in juvenile tortoises Histopathology and isolation of a novel picornavirus from Testudo graeca and Geochelone elegans W. Heuser 1 ; H. Pendl 2 ; N. J. Knowles 3 ; G. Keil 4 ; W. Herbst 5 ; M. Lierz 1 ; E. F. Kaleta 1 1 Clinic for Birds, Reptiles, Amphibians and Fish, Justus Liebig University (JLU), Giessen, Germany; 2 PendlLab, Steinhausen, Switzerland; 3 The Pirbright Institute, Pirbright, Woking, UK; 4 Friedrich-Loeffler-Institute, Federal Research Institute for Animal Health, Insel Riems, Germany; 5 Institute of Hygiene and Infectious Diseases of Animals, JLU, Giessen, Germany For personal or educational use only. No other uses without permission. All rights reserved. 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