REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - FÉVRIER 2013 - N°449 // 71
article reçu le 15 juin, accepté le 17 juin 2012.
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SUMMARY
Monitoring and validation of teicoplanine by HPLC
A high-performance liquid chromatography method
was developed for the rapid determination of teico-
planine in human serum. After protein precipitation
and extraction, chromatographic separation of tei-
coplanine in human serum was achieved with a C18
column. The mobile phase consisted of phosphate
buffer, methanol and acetonitrile 80/11/9 (v/v/v), pH 4.
Quantitative determination was monitored using UV
detector at wavelength of 220 nm. Sulfamethoxazole
was used as internal standard. Calibration curve is
linear over the range 0.5 to 30 μg/mL (r=0.99). Limit
of detection and limit of quantiication are 0.034 and
0.104 μg/ mL, respectively. Within-day coeficient
of variation (1.31 to 2.64 %) and day-to-day coefi-
cient of variation (4.46 to 5.72 %) at three different
concentrations are accurate for this analysis. Rela-
tive recovery ranges from 98.14 to 99.4 % at three
different concentrations. Each analysis requires no
longer than 12 min.
Teicoplanine – HPLC – drug monitoring.
RÉSUMÉ
Nous proposons une méthode par chromatographie liquide à haute per-
formance (CLHP) pour la quantiication rapide de la teicoplanine sérique
après déprotéinisation, extraction, chromatographie sur une colonne C18
et détection UV-Visible (longueur d’onde : 220 nm). La phase mobile est
composée d’un mélange composé de tampon phosphate à 20 mmol/L,
méthanol et acétonitrile, 80/11/9 (v/v/v), ajusté à pH 4. Le sulfaméthoxa-
zole est utilisée comme étalon interne. L’étalonnage est linéaire entre 0,5
à 30 μg/ml (r = 0,99). Les limites de détection et de quantiication sont
respectivement de 0,034 et 0,104 μg/mL, la répétabilité et la reproductibilité
de respectivement 1,31 à 2,64 % et 4,46 à 5,72 % à trois concentrations
différentes. Le taux de recouvrement varie de 98,14 % à 99,4 % à trois
concentrations différentes. Dans ces conditions, le temps d’analyse est
inférieur à 12 minutes.
Teicoplanine – CLHP – suivi thérapeutique.
Nadia Jebabli
a,
*, Emna Gaïes
a
, Sameh Trabelsi
a
, Issam Salouage
a
, Rim Chari
a
, Mohamed Lakhal
a
, Anis Klouz
a
Mise au point et validation d’une méthode
de dosage de la teicoplanine par
chromatographie liquide à haute performance
a Service de pharmacologie clinique
Centre national de pharmacovigilance
9, av. Dr Zouheïre Essafi
1006 Tunis - Tunisie
* Correspondance
jebabli-nadia@voila.fr
méthode CLHP que nous proposons met en œuvre la tech-
nique de polarité de phase inversée avec un étalon interne
(le sulfaméthoxazole), une déprotéinisation, une extraction
centrifugation et une détection UV-visible. L’objectif de ce
travail a été de mettre au point et de valider une méthode
analytique simple et rapide de la teicoplanine sérique.
2. Matériel et méthodes
Ce travail a été réalisé dans le Service de pharmacologie
clinique du Centre national de pharmacovigilance.
2.1. Échantillons
La teicoplanine et le sulfaméthoxazole (étalon interne, EI)
ont été fournis par le Laboratoire Aventis et l’eau puriiée
produite par un système milliQ (18,2 MX) de chez Millipore.
2.2. Appareillage
Le système de CLHP utilisé dans notre travail est com-
posé d’une Pompe Prostar 240, d’un détecteur UV-visible
Prostar 325 LC, d’un four Prostar 510 et d’un auto-sam-
pler Prostar 410. Les chromatogrammes sont enregistrés
1. Introduction
La teicoplanine est un antibiotique bactéricide qui appartient
à la famille des glycopeptides découverts en 1956 et ayant
un haut poids moléculaire. Elle est utilisée dans le traite-
ment des infections sévères à Staphylococcus aureus [1].
Un suivi thérapeutique pharmacologique de la teicopla-
nine est nécessaire avec la mesure de la concentration
résiduelle sanguine [2-4].
Le dosage plasmatique de ce médicament se justiie pour
vériier son eficacité et prévenir ses effets indésirables. De
nombreuses méthodes de dosage de la teicoplanine par
chromatographie liquide haute performance (CLHP) dans
les milieux biologiques ont été décrites. Plusieurs méthodes
permettent la détermination simultanée de la teicoplanine
et de ses métabolites [5, 6]. Cependant, elles font le plus
souvent intervenir plusieurs étapes d’extraction [7-9]. La