Article original Ann Biol Clin 2011 ; 69 (1) : 41-5 Évaluation d’une technique fluorimétrique pour la détermination de l’activité de l’amylo-1,6-glucosidase leucocytaire pour la confirmation du diagnostic des glycogénoses de type III Evaluation of a fluorimetric for determining the activity of amylo-1,6-glucosidase in leukocytes for confirming the diagnosis of glycogen storage disease type III Hanène Miadi-Messaoud Amira Mili Hammadi Ben Khalifa Khalifa Limem Faculté de médecine Ibn El Jazzar, Sousse, Tunisie <hanene_as@yahoo.fr> Article rec ¸u le 7 avril 2010, accept ´ e le 22 juillet 2010 Résumé. La confirmation du diagnostic de glycogénose de type III est basée sur des examens spécialisés appliqués sur des biopsies hépatiques et/ou musculaires généralement très douloureuses pour l’enfant. Ces explorations histologiques nécessitent un transfert à l’étranger des fragments biopsiques frais ou conge- lés qui posent toujours des problèmes de délai et de sensibilité. L’intérêt de ce travail est d’évaluer la technique fluorimétrique pour la détermination de l’activité enzymatique de l’amylo-1,6-glucosidase sur des préparations leu- cocytaires afin de confirmer le diagnostic de glycogénose de type III. Notre méthode consiste à mesurer le glucose libéré par hydrolyse d’une phospho- rylase dextrine limite en présence d’extraits cellulaires des tissus concernés, pour 50 sujets témoins et 18 patients suspects cliniquement d’une atteinte de type glycogénose. L’avantage et l’originalité de cette technique reposent sur sa linéarité, sa précision (CV = 1,68 %), son exactitude (CI = 0,17 %), sa haute sensibilité (Sn = 100 %) et sa spécificité (Sp = 96,1 %). Elle représente un précieux auxiliaire permettant la mesure des deux activités transférasique (- 1,4) et hydrolytique (-1,6) de l’enzyme débranchante. La technique testée est pratique, peu coûteuse, fiable, efficace et elle peut être appliquée dans la majo- rité des laboratoires de biologie clinique. La comparaison avec la radiométrie et l’immunoblot montre une importante capacité discriminante entre sains et malades, entre sains et hétérozygotes et entre glycogénose de type III et les autres types de cette pathologie (I et VI). Mots clés : amylo-1,6-glucosidase, enzyme débranchante, glycogénose de type III, leucocytes, technique fluorimétrique Abstract. The confirmation of type III glycogen storage disease diagnosis is based on histological explorations on to live and/or muscle biopsies that induce some problems of delay and sensitivity. The purpose of this study was to evaluate a fluorimetric technique for the determination of amylo-1,6-glucosidase acti- vity in leukocytes, in order to confirm the diagnosis of type III glycogen storage disease. The method consists in measuring the glucose released by hydrolysis of phosphorylase dextrin limit in the presence of cellular extracts, in 50 volun- teers and 18 patients suspected of glycogenosis. Benefits of this technique are linearity, precision (CV = 1.68%), exactitude (CI = 0.17%), its high sensitivity doi:10.1684/abc.2010.0514 Tirés à part : H. Miadi-Messaoud 41 Pour citer cet article : Miadi-Messaoud H, Mili A, Ben Khalifa H, Limem K. Évaluation d’une technique fluorimétrique pour la détermination de l’activité de l’amylo-1,6-glucosidase leucocytaire pour la confirmation du diagnostic des glycogénoses de type III. Ann Biol Clin 2011 ; 69(1) : 41-5 doi:10.1684/abc.2010.0514 Copyright © 2016 John Libbey Eurotext. Téléchargé par un utilisateur anonyme le 22/11/2016.