93 Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci., São Paulo, v. 49, n. 2, p. 93-101, 2012 Metabolismo oxidativo de leucócitos em animais infectados pelo Vírus da Leucemia Bovina Oxidative burst of leukocytes from bovine leukemia Virus-Infected Cattle Milton Ricardo AZEDO 1 ; Cristina de Oliveira MASSOCO 2 ; Maiara Garcia BLAGITZ 1 ; Fernando Nogueira de SOUZA 1 ; Fabio Celidônio POGLIANI 1 ; Fernando José BENESI 1 ; Alice Maria Melville Paiva DELLA LIBERA 1 1 Departamento de Clínica Médica da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo, São Paulo – SP, Brasil 2 Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo, São Paulo – SP, Brasil Correspondência para: Alice Maria Melville Paiva Della Libera Departamento de Clínica Médica Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Universidade de São Paulo Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva, 87 – Cidade Universitária 05508-000 – São Paulo, SP Recebido em: 16/05/2011 Aprovado em: 18/04/2012 Resumo A infecção pelo vírus da leucemia bovina (VLB) leva ao desenvolvimento de linfocitose persistente (LP) ou linfossarcomas, principalmente em rebanhos bovinos leiteiros. Entretanto, os eventos que induzem tais manifestações ou o efeito da infecção na função das diferentes populações de leucócitos são pouco conhecidos. Avaliou-se o efeito da infecção pelo VLB na produção intracelular de peróxido de hidrogênio (H 2 O 2 ) em leucócitos circulantes, mensurada pela fluorescência produzida pela diclorodihidrofluoresceína, utilizando-se de citometria de fluxo. As células foram obtidas de cinco vacas soronegativas; cinco vacas infectadas pelo VLB, alinfocitóticas; e cinco vacas infectadas, manifestando LP. Verificou-se que a infecção pelo VLB não altera a porcentagem de leucócitos circulantes produzindo H 2 O 2 , com ou sem prévio estímulo por adição in vitro: de 12-miristato 13-acetato de forbol (PMA); de lipopolissacarídeos de Escherichia coli (LPS); ou Staphylococcus aureus. Todavia, a produção de H 2 O 2 em leucócitos de animais apresentando LP, com ou sem estímulo, foi menor que aquela verificada em leucócitos de animais soronegativos e de animais soropositivos alinfocitóticos. Os estímulos aumentaram a porcentagem de leucócitos produzindo H 2 O 2 e a produção intracelular média em animais soronegativos ou naqueles infectados alinfocitóticos. Contudo, em leucócitos de vacas soropositivas manifestando LP, a fagocitose de S. aureus não elevou a porcentagem de leucócitos produzindo H 2 O 2 . Também, apenas a adição de PMA elevou a produção intracelular de H 2 O 2 em leucócitos de fêmeas soropositivas manifestando LP. Concluiu-se que bovinos infectados pelo VLB, manifestando LP, apresentam menor produção intracelular de H 2 O 2 , demonstrando vulnerabilidade funcional refletida por imunossupressão. Palavras-chave: Radicais livres. Leucócitos. Deltaretrovírus. Leucose enzoótica bovina. Bovinos. Abstract Widespread Bovine Leukemia Virus (BLV) infection leads to persistent lymphocytosis (PL) or lymphosarcoma, mainly in dairy herds. Nevertheless, neither the sequence of events that conducts to these symptoms, nor the effect of infection on function of different leukocyte populations, is well known. We evaluated the effect of BLV infection on immune response of cows through the analysis of hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) intracellular production of circulating leukocytes after in vitro stimuli with phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA), Escherichia coli lipopolysaccharides (LPS), or Staphylococcus aureus. Cells were obtained from five BLV-non infected cows, five BLV-infected, non-lymphocytotic cows, and five BLV-infected cows with PL, and analyzed by flow cytometry. Intracellular production of H 2 O 2 was measured by dichlorodihydrofluorescein diacetate dependent fluorescence. Results showed that BLV infection does not alter the percentage of H 2 O 2 -producing circulating leukocytes (H 2 O 2 -PCL), with or without previous stimuli. However, the average of H 2 O 2 intracellular production, with or without previous stimuli, in leukocytes obtained from cows with PL was smaller than those from cells obtained from BLV-negative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Moreover, stimuli increased H 2 O 2 intracellular production and the percentage of H 2 O 2 -PCL obtained from BLV- negative cows and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows. Conversely, neither phagocytosis of S. aureus and stimulus with LPS increases H 2 O 2 intracellular production, nor phagocytosis increases the percentage of H 2 O 2 -PCL, when leukocytes were obtained from cows with PL. Thus, results show that BLV-infected cattle, with PL, have an impaired H 2 O 2 intracellular production, demonstrating functional vulnerability reflected by immunosuppression. Keywords: Free radicals. Leukocytes. Deltaretrovirus. Enzootic bovine leukosis. Cattle.