Universidade Estadual de Londrina - Rodovia Celso Garcia Cid, Pr 445, Km 380 - Campus Universitário Caixa Postal 10.011 CEP 86057-970 Centro de Ciências Exatas - Departamento de Bioquímica e Biotecnologia Fone +55 (43) 3371.4270 - biq@uel.br Biossíntese de levana de alto peso molecular por levanasacarase de Bacillus subtilis natto Isadora Cernach Carneiro da Fontoura 1 , Gabrielly Terassi Bersaneti 1 , Hanny Cristina Braga Pereira 1 , Janaina Mantovan 1 , Agnes Magri 1 e Maria Antonia Pedrine Colabone Celligoi 1 1 Universidade Estadual de Londrina – Departamento de Bioquímica e Biotecnologia Caixa Postal 10.101 – CEP 86057-970 - Londrina – PR - E-mail: isaacernach1@gmail.com RESUMO A levanasacarase, enzima extracelular que pode ser obtida de Bacillus subtilis natto, é uma frutosiltransferase bifuncional responsável por produzir levanas de alto e baixo peso molecular. Essa enzima pode ser obtida através do processo fermentativo. O Objetivo desse trabalho foi avaliar síntese enzimática de levana por Delineamento Composto Central Rotacional, variando o tempo e a proporção de extrato enzimático e sacarose. Os resultados demonstraram que em maior tempo e em menor proporção de extrato enzimático/sacarose ocorreu a maior síntese enzimática atingindo 37,78 g/L. Palavras-chave: levanasacarase; enzima; levana; Bacillus subtilis INTRODUÇÃO Bacillus subtilis é uma bactéria Gram-positiva e formadora de esporos que pode crescer em meio contendo fontes de carbono, nitrogênio, fósforo e outros sais essenciais. Tem sido amplamente estudada para a produção de levanasacarase, uma enzima extracelular, que sintetiza levana de alta e baixa massa molecular, quando são alteradas as condições de fermentação. Essa enzima é uma frutosiltransferase bifuncional que promove a hidrólise da sacarose e catalisa a formação de levana e fruto-oligossacarídeos (Hijum, 2003 e SILVA, 2012). A interação entre o substrato (sacarose) e a enzima ocasiona a reação de transfrutosilação pela levanasacarase que polimeriza as unidades de frutose levando a formação de levana microbiana. Esse processo de polimerização origina cadeias com tamanhos moleculares variados desde oligossacarídeos que tem menor grau de polimerização, até os polissacarídeos que apresentam um alto grau. A levana tem uma variedade de aplicações principalmente, nas áreas de alimentos e farmacêutica devido às suas propriedades físicas e as suas funções biológicas. Essas propriedades refletem suas funções que é diretamente dependente de seu peso molecular e sua estrutura. O objetivo desse trabalho foi avaliar a síntese enzimática da levana pela levanasacarase variando a concentração do extrato enzimático e da sacarose em diferentes tempos de reação.