Copyright © 2010 APIDPM Santé tropicale. Tous droits réservés. Mise au point d’une technique d’obtention de gammaglobulines pures à partir de sang humain A. BOUMENDJEL¹, M. MESSARAH², S. BENYAHIA³, A. LADJAMA ALI¹, N. BOUZERNA¹ Résumé Dans le but d’élaborer une technique d’obtention de gammaglobulines pures à partir de sang humain, nous avons comparé deux protocoles expérimentaux basés sur les méthodes de précipitation et sur la chromatographie d’échange d’ions. Pour cela, nous avons, tout d’abord, pré-purifié nos échantillons de départ, dans un premier protocole, par une suite de cryoprécipitation, dessalage par filtration sur gel Trisacryl GF05 puis chromatographie sur DEAE Trisacryl, et dans un second protocole, par une suite de précipitation au le sulfate de sodium, une dialyse, puis une chromatographie sur DEAE Cellulose. Nous avons, ainsi, démontré l’efficacité, la reproductibilité et la fiabilité du second protocole qui offre des gammaglobulines d’une qualité supérieure à celle du premier protocole, avec un rendement de 15.5% et une pureté de 87.36%. Abstract The development of a technique for obtaining pure gammaglobulins from human blood In order to work out a pure technique of obtaining gammaglobulins, two experimental protocols have been compared, which were based on the methods of precipitation and ions exchange chrom- atography. In the first protocol, samples have been purified by a continuous cryoprecipitate, desalting out by filtration on Trisacryl GF05, and then on DEAE Trisacryl chromatography. In the second protocol, samples have been purified by a continuous precipitation, using sodium sulphate, dialysis, and then a DEAE cellulose chromatography. Thus, results have showed the effectiveness, the reproducibility and the reliability of the second protocol, which offered gamma globulins which purity, is higher than those from the first protocol, with an output of 15.5% and a purity of 87.36%. 1. Labo. Biochimie et microbiologie appliquées. Unité immunobiologie. Dpt de biochimie, fac. des sciences, Univ. Badji Mokhtar, Annaba, Algérie. 2. Labo. recherche en écophysiologie animale. Dpt de biologie. Fac. des sciences, Univ. Badji mokhtar, Annaba, Algérie. 3. Labo. biochimie, CHU Ibn Sina, Annaba, Algérie. Mots clés : Purification, Gammaglobulines, IgG, Chromatographie, Précipitation, Electrophorèse Keywords : Purification, Gammaglobulins, IgG, Chromatography, Precipitation, Electrophoresis Les immunoglobulines G (IgG) dérivées du sérum humain sont fréquemment utilisées comme produit biopharmaceutique dans le traitement des maladies auto-immunes et inflammatoires [1, 2]. Sur le plan clinique et pour des raisons de sécurité, les IgG utilisées doivent être très pures sans aucun contami- nant protéique pouvant provoquer des effets indésirables chez les patients [2]. Aussi, la purification des IgG constitue un véritable défi en raison de la complexité du sérum humain et de la grande quantité d’albumine présente dans ce dernier Plusieurs méthodes de purification ont été signalées dans la littérature [3] dont la plupart permettent d’obtenir soit une haute résolution avec un rendement faible ou un rendement élevé avec un faible taux de pureté et certai- nes d’entre elles sont potentiellement difficiles à réaliser à grande échelle. Par conséquent, le développement d’un système efficace avec une technique peu coûteuse pour la purifi- cation de l’IgG humaine est souhaitable. Ainsi, dans le but de mettre au point un proto- Médecine du Maghreb N°178 - Juillet-Août 2010 Introduction