einstein 2003; 1:84-8 Estudo da viabilidade da cultura de condrócitos humanos 84 ARTIGO ORIGINAL Estudo da viabilidade da cultura de condrócitos humanos visando aplicação clínica para o transplante autólogo* Study on human chondrocyte culture viability for autologous transplantation in clinical application Christiane Lombello 1 , Geraldo Marins dos Reis Jr 2 , Moisés Cohen 3 *Trabalho realizado no Hospital Israelita Albert Einstein, São Paulo/SP, em parceria com o Laboratório Biológica, Campinas /SP, e Departamento de Ortopedia e Traumatologia da Unifesp/EPM (SP). 1 Doutora em Biologia Celular e Estrutural pela Universidade Estadual de Campinas (SP). 2 Mestre em Engenharia Biomédica pela Universidade Estadual de Campinas (SP). 3 Professor Livre-docente, Chefe do Centro de Traumatologia do Esporte da Disciplina de Traumatologia do Departamento de Ortopedia e Traumatologia da Universidade Federal de São Paulo - Unifesp/EPM (SP). Endereço de correspondência: Christiane Lombello - R. Perez Y Marin, 81 - Guanabara - CEP 13020-250 - Campinas (SP) - e-mail- clombello@hotmail.com Recebido em 1 de julho de 2003 – Aceito em 22 de outubro de 2003 ABSTRACT Objective: The limited regenerative capacity of the cartilage tissue makes the treatment of chondral lesions difficult. The techniques currently available to treat cartilage lesions may relieve symptoms, but do not regenerate the injured tissue. Autologous chondrocyte transplantation uses cell biology and cell culture techniques to regenerate the hyaline cartilage. Methods: In this study, we analyze chondrocyte biopsy collection and culture for autologous transplantation. Ultrastructural analyses of hyaline cartilage biopsies were performed 0, 6, 24 and 48 hours after collection. The tissue even after 48 hours. Eleven cell culture assays were performed to evaluate isolation, viability, morphology, proliferation and absence of contaminants. Results: The cell culture techniques used allowed chondrocyte proliferation. Rates on cell viability were maintained above the acceptable patterns (above 90). Control of cell culture laboratory conditions showed absence of contaminants, assuring safety of the process. The chondrocytes obtained presented the morphology typical of cultured cell monolayers. Conclusion: The results indicate viability of chondrocyte culture technique for clinical application in autologous transplantation. Keywords: Cell culture; Chondrocytes/transplantation; Transplantation, autologous/methods; Cartilage RESUMO Objetivo: A baixa capacidade regenerativa do tecido cartilaginoso dificulta o tratamento das lesões condrais. As técnicas disponíveis atualmente para o tratamento de lesões de cartilagem articular podem resultar em alívio dos sintomas, mas não na regeneração do tecido lesado. O transplante autólogo de condrócitos utiliza técnicas de biologia celular e cultura de células para a regeneração da cartilagem hialina. Neste trabalho procuramos analisar a cultura de condrócitos visando o transplante autólogo. Métodos: Foram realizados 11 experimentos de cultura celular para avaliar os dados de isolamento, viabilidade, morfologia, proliferação e ausência de contaminantes. As condições de cultura celular utilizadas permitiram a proliferação dos condrócitos. As taxas de viabilidade celular se mantiveram acima de 90%. Resultados: O controle das condições do laboratório de cultura celular demonstrou a ausência de contaminantes, garantindo a segurança do processamento. As células obtidas apresentaram morfologia típica de condrócitos cultivados em monocamada. Conclusão: Os resultados obtidos indicam a viabilidade da técnica de cultura de condrócitos para a aplicação clínica na técnica de transplante autólogo. Descritores: Cultura de células; Condrócitos; Transplante autólogo/ métodos; Cartilagem INTRODUÇÃO A nutrição do tecido cartilaginoso das superfícies articulares é realizada por meio da difusão de substâncias encontradas no líquido sinovial. Os condrócitos presentes no tecido são altamente especializados e sua principal função é conferir as propriedades biomecânicas, pela síntese dos com- ponentes da matriz extracelular. Na cartilagem articular estão presentes proteoglicanos, principalmente o agregan, e colágeno tipo II preferencialmente. O estado diferenciado dos condrócitos e mesmo a ausência de vascularização do tecido dificultam o reparo de lesões condrais. O reparo tecidual das lesões condrais se baseia em técnicas cirúrgicas cujo princípio é o preenchimento da lesão com células mesenquimais provenientes da medula óssea subcondral, como abrasão, perfurações e microfraturas. No entanto, as lesões são preenchidas por tecido fibroso, ou fibrocartilagem, com carac- einstein 2003; 1:84-8