ESTUDIO DE LA ESPECIFICIDAD DE VARIOS PREPARADOS ENZIMÁTICOS DE PROTEASAS MEDIANTE SDS-PAGE Isabel Blasco Castiñeyra, Sonsoles de la Viña Ferrer y Margarita San Andrés Moya. Departamento de Pintura-Restauración Facultad de Bellas Artes. Universidad Complutense de Madrid, C/ Greco nº 2 (28040) Madrid. E-mail: msam@art.ucm.es INTRODUCCIÓN Durante algunos procesos de restauración de obras de arte policromadas, puede ser necesaria la eliminación selectiva de ciertos materiales de naturaleza proteica, como la cola de origen animal, la clara y la yema de huevo y la caseína de la leche. Los métodos tradicionales más eficaces para la eliminación de este tipo de sustancias son los basados en la utilización de reactivos ácidos o alcalinos. Éstos presentan como principales inconvenientes su escasa especificidad y las condiciones extremas de pH (Burnstock and Learner, 1992). Por otra parte, la tendencia actual a la hora de elaborar una estrategia de limpieza de una obra de arte se basa en los siguientes principios: -Caracterización físico-química de los componentes de la obra con el fin de identificar las sustancias que van a ser eliminadas y las que deben permanecer inalteradas. -Diseño de un protocolo de limpieza coherente y concreto para cada caso, teniendo en cuenta las ventajas e inconvenientes de la metodología seleccionada. Una de las principales exigencias es que el resultado del procedimiento empleado sea controlable y lo más selectivo posible. Dentro de este contexto, la utilización de enzimas proteolíticas para la fragmentación y eliminación de sustancias proteicas, puede ser una alternativa a los métodos tradicionales de limpieza (Blasco et al 2005). Las enzimas poseen la ventaja de eliminar de forma especifica ciertos materiales, actuando en un medio acuoso y en unas condiciones de pH compatibles con la estabilidad de la obra (Blasco, 2004). Sin embargo, aunque son numerosos los trabajos en los que se ha utilizado esta metodología para la eliminación de sustancias proteicas (Segal and Cooper, 1977; Grattan et al, 1987; Makes, 1981, 1984, 1987; Stingari, 1990; Buttazzoni et al, 1999), son escasos aquellos de los que se puedan extraer conclusiones generales, que sugieran una metodología de trabajo que permita un control del proceso fiable y reproducible. Dentro de éstos hay que destacar el de Buttazoni et al, 1999 en el que proponen la utilización de la técnica de electroforesis en geles de poliacrilamida para el control del efecto de las proteasas utilizadas sobre un barniz de clara de huevo. No obstante, la