996 Rev Inv Vet Perú 2018; 29(3): 996-1008 http://dx.doi.org/10.15381/rivep.v29i3.14008 1 Centro de Inmunoproducción Masiva de Anticuerpos, Fundación Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Caracas, Venezuela 2 Grupo de Investigación en Sanidad Animal y Humana (GISAH), Carrera Ingeniería en Biotecnología, Departamento de Ciencias de la Vida, Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE, Santo Domingo, Ecuador 3 Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Central de Venezuela, Maracay, Venezuela 4 Grupo de Investigación en Sanidad Animal y Humana (GISAH), Carrera Ingeniería en Biotecnología, Departamento de Ciencias de la Vida, Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE, Sangolquí, Ecua- dor; Programa Prometeo, SENESCYT, Biophysic Solutions CA, Caracas, Venezuela 5 E-mail: jdrr55@yahoo.com Trabajo financiado por los proyectos: 26193 BID-FONACIT II y Sub-Proyecto N°1 2007001425 Misión Ciencias FONACIT El trabajo representa parte de la tesis doctoral de José David Rosales en Biotecnología, Mención Animal, de la Escuela Socialista de Agricultura Tropical (ESAT) Recibido: 28 de noviembre de 2017 Aceptado para publicación: 31 de mayo de 2018 Clonación, expresión y evaluación inmunológica de la proteína Omp31 de Brucella melitensis y evaluación de su posible uso para el diagnóstico en brucelosis bovina CLONING, EXPRESSION AND IMMUNOLOGICAL EVALUATION OF THE OMP31 PROTEIN OF Brucella melitensis AND EVALUATION OF ITS POSSIBLE USE FOR THE DIAGNOSIS IN BOVINE BRUCELLOSIS Jose-David Rosales 1,5 , Annie Castillo Ochoa 1 , Armando Reyna-Bello 2 , Ana Teresa Serrano 3 , Rodolfo Fernández-Gomez 4 RESUMEN El diagnóstico serológico de la brucelosis se lleva a cabo por la detección de anticuerpos generados contra el liposacárido «LPS» o extractos bacterianos de células enteras por ELISA o pruebas de aglutinación. El objetivo del trabajo fue evaluar una proteína recombinante que pueda ser usada en el diagnóstico serológico de la brucelosis bovina. Se escogió el gen de la Omp31 de Brucella melitensis 16M. El gen fue clonado a partir de ADN de B. melitensis. La expresión de la proteína Omp31r se realizó en un sistema de expresión procariota utilizando el vector pET28a y la purificación por cromatografía de afinidad a metales (IMAC). Un ELISA indirecto fue estandarizado utili- zando sueros controles de bovinos positivos y negativos. La proteína Omp31r reaccionó