Berita Biologi, Volume 5, Nomor4, April 2001 PENGARUH PEMBERIAN ELISITOR EKSTRAK KHAMIR Saccharomyces cerevisiae Hansen TERHADAP KANDUNGAN AJMALISIN DALAM KULTUR AGREGAT SEL Catharanthus roseus (L.) G. Don. [The Effect of Elicitation by Using Extract of Saccharomyces cerevisiae Hansen on Ajmalicine Content in Cell Aggregates Culture of Catharanthus roseus (L.) G.Don.] El. Jujun Ratnasari , Arbayah H Siregar**, dan Rizkita RE*** Biologi, Institut Teknologi Bandung Jl. GaneshaNo.10 . Telp. (022) 2509172 ext: 3177 *e-mail: iratnasari@vahoo.com; **e-mail: arbavah@bi.itb.ac.id; ***e-mail: rizkita(S),bi.itb.ac.id ABSTRACT There were many ways to obtain high production of secondary metabolites in plant tissue culture; among the other is elicitation. An experiment to study the effect of elicitor derived from Saccharomyces cerevisiae Hansen extract on ajmalicine content in cell aggregates culture of Catharanthus roseus (L.) G.Don, has been conducted. The media used for callus induction and cell aggregates culture were Zenk (1977) with addition of 2.5 x 10" 6 M Naphthalene Acetic Acid (NAA) and 10' 5 M 6-Benzilaminopurine (BAP). The cell aggregates culture was subcultured three times and then elicitated with elicitor derived from autoclaved 5. cerevisiae extract at concentrations 0.5, 1.0, 2.5%, and harvested at 18, 24, and 36 hours after elicitation. The ajmalicine was analyzed qualitatively and quantitatively by using High Pressure Liquid Chromatography (HPLC) connected to chromatopack CR-7A Plus. The cell aggregates of C. roseus culture produced ajmalicine both in the cells and the media. The result of elicitation showed that ajmalicine content was influenced significantly by concentration and harvesting time. The highest ajmalicine content in the cell aggregates was 25.288 ± 0.102 jig/g dw, whilst that in media was 524.600 ± 0.566 \\ML. The optimum concentration of S. cerevisiae extract was 0.5%, and the best harvesting time was 24 hours. Kata kunci/ key words: Ajmalisin/ajmalicine; elisitor/elicitor; VhsraitlSaccharomyces cerevisiae; kultur agregat sel/cell aggregates culture; Catharanthus roseus. PENDAHULUAN Ajmalisin adalah metabolit sekunder dari golongan alkaloid indol yang dihasilkan oleh tanaman Catharanthus roseus dan berguna sebagai obat anti hipertensi (Zenk, 1977). Senyawa ini potensial untuk diproduksi dalam jumlah tinggi dan waktu singkat, karena sekitar 3600 kg diperlukan per tahun (Verpoorte, 1991). Kultur jaringan tumbuhan merupakan teknologi alternatif untuk menghasilkan metabolit sekunder karena mempunyai beberapa keuntungan, diantaranya adalah penggunaan lahan sedikit, kualitas produk yang dihasilkan lebih konsisten dan dapat dihasilkan terus menerus, serta metabolit sekunder yang dihasilkan mudah untuk dimurnikan (Fowler, 1983). Produksi metabolit sekunder ini dapat menggunakan kultur kalus maupun kultur suspensi. Kultur suspensi diantaranya adalah kultur agregat sel. Salah saru keuntungan dari kultur ini adalah laju pertumbuhan selnya relatif lebih cepat, karena sel langsung kontak dengan medium. Namun demikian, pada beberapa kultur produksi metabolit sekundernya relatif masih rendah (Lindsey dan Yeoman, 1983). Untuk mengatasi masalah tersebut dapat digunakan teknik elisitasi (Buitelaar, 1991). Elisitasi adalah teknik pemberian materi abiotik maupun biotik ke dalam sel tumbuhan sehingga produksi metabolit sekunder tumbuhan dapat meningkat, sebagai respon tumbuhan dalam mempertahankan diri (Buitelaar, 1991). Elisitasi pada kultur suspensi C. roseus dengan mengguna- kan elisitor jamur Pythium aphanidermatum berhasil meningkatkan produksi ajmalisin sebanyak 53 kali lipat, sedangkan khamir Rhodotorula rubra hanya mampu meningkatkan sepertiganya (Eilert, 1986). Adapun khamir Saccharomyces cerevisiae mampu meningkatkan produksi antosianin 349