中草药 Chinese qraditional and eerbal arugs 第 QT 卷第 NQ 期 OMNS 年 T 月 ·OQVT· 原儿茶酸对 N-甲基-Q-苯基吡啶离子损伤中脑多巴胺能神经元保护作用研究 宁巧庆 1 ，刘 爽 1 ，李亚晨 2 ，李 岚 1 ，于 燕 1 ，赵文香 1 ，张秀丽 1* 1. 滨州医学院，山东 烟台 264003 2. 大连医科大学，辽宁 大连 116044 摘 要：目的 探讨原儿茶酸对 1-甲基-4-苯基吡啶离子（MPP + ）干预后的小鼠胚胎中脑多巴胺能神经元损伤的保护作用。 方法 分离培养孕 14 d 小鼠胚胎中脑神经元细胞，连续培养 7 d，以 MPP + 体外损伤小鼠胚胎中脑多巴胺能神经元诱导帕金 森病（PD）模型，实验分为对照组，模型组，原儿茶酸低（0.05 mmol/L）、中（0.1 mmol/L）、高（0.5 mmol/L）量组。采 用 MTT 比色法测定神经元活，测定细胞内乳酸脱氢酶（LDH）、活性氧物质（ROS）的量，检测线粒体复合物 I 活性及膜 电位。结果 原儿茶酸可增强 MPP + 损伤的中脑多巴胺能神经元活，减少 LDH 释放，降低 ROS 产生，抑线粒体复合物 I 活下降，阻止线粒体膜电位降低。结论 原儿茶酸对 MPP + 诱导的中脑多巴胺能神经元损伤具有保护作用。 关键词：1-甲基-4-苯基吡啶离子；原儿茶酸；中脑；多巴胺能神经元；神经保护；乳酸脱氢酶；活性氧；膜电位 中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)14 - 2497 - 05 alf: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.14.018 mrotective effect of protocatechuic acid on midbrain dopaminergic neurons injured by NJmethylJQJphenylpyridinium NING Qiao-qing 1 , LIU Shuang 1 , LI Ya-chen 2 , LI Lan 1 , YU Yan 1 , ZHAO Wen-xiang 1 , ZHANG Xiu-li 1 1. Binzhou Medical University, Yantai 264003, China 2. Dalian Medical University, Dalian 116044, China Abstract: lbjective To investigate the effects of protocatechuic acid (PCA) on the midbrain dopaminergic neurons injured by 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP + ). jethods Midbrain neuron cells from KM mice pregnant 14 d were used in this experiment, and divided into control group, model group, low-, mid-, and high-dose (0.05, 0.1, and 0.5 mmol/L) groups. MTT method was used to determine the neuronal survival rate. The activity of lactate dehydrogenase (LDH) in culture, content of intracellular reactive oxygen species (ROS), activity of mitochondrial complex I, and mitochondrial membrane potential were further determined. oesults PCA can enhance the viability of dopaminergic neurons damaged by MPP + , reduce the release of LDH and the generation of ROS, increase the activity of the mitochondrial complex Ι, and prevent the reduction of mitochondrial membrane potential. Conclusion PCA has the neroprotective effects against MPP + -induced damage of midbrain dopaminergic neurons. hey words: 1-methyl-4-phenylpyridinium; protocatechuic acid; midbrain; dopaminergic neuron; neuroprotection; lactate dehydrogenase; reactive oxygen species; membrane potential 帕金森病（PD）是一种锥体外系的变性疾病，研 究显示其主要病理志为选择性黑质多巴胺（DA） 神经元缺失，残存神经元呈现 α-突触核蛋白，泛素 色阳性的胞浆内形成涵体，导致黑质-纹状体通路 DA 释放减少。患者可出现静止性震颤、肌张增高、 运减少等一系列症状 [1-3] ，显著降低了患者的生活质 量和预期寿命，危害性大 [4-6] 。PD 是多种协同 作用的结，目研究显示主要与遗传、环境因素、 感、衰老、氧应激、过多的自由基形成及神经生 长因子缺乏等有关，但具体发病尚未明确 [7] 。1- 甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）是一种能被单 胺氧酶 B（MAO-B）代谢的神经毒性物质，MPTP 可被 MAO-B 代谢生成 1- 甲基-4- 苯基吡啶离子 （MPP + ），进而 MPP + 转运多巴胺能神经元末梢， 收稿日期：2016-03-23 基金项目：国家自然科学基金资项目（81102828，81273037）；山东省自然科学基金资项目（2015ZRB14548） 作者简介：宁巧庆（1989—），女，硕士在读，研究方向为麻醉药理学。Tel: (0535)6913254 *通信作者 张秀丽，女，博士，教授，硕士生导师，主要从事药理和毒理研究。Tel: (0535)6913254 E-mail: zhangxiuli2008@163.com