O. Evliyaoğlu et al. New insights into blood coagulation 173 J Clin Exp Invest www.clinexpinvest.org Vol 1, No 3, December 2010 Yazışma Adresi /Correspondence: Dr. Osman Evliyaoğlu, Dicle Üniversitesi Tıp Fakültesi, Biyokimya Anabilim Dalı, Diyarbakır, Türkiye Email: oevliya@hotmail.com Geliş Tarihi / Received: 25.07.2010, Kabul Tarihi / Accepted: 12.10.2010 Copyright © Klinik ve Deneysel Araştırmalar Dergisi 2010, Her hakkı saklıdır / All rights reserved Klinik ve Deneysel Araştırmalar Dergisi / Cilt/Vol 1, No 3, 173-176 Journal of Clinical and Experimental Investigations ORIGINAL ARTICLE / ÖZGÜN ARAŞTIRMA A diferent insight into blood coagulation in vitro İnvitro pıhtılaşmaya farklı bir bakış açısı Osman Evliyaoğlu 1 , Selvi Kelekçi 2 , M. Kemal Başaralı 1 , Birgül Işık 1 , Beri Hocaoğlu Bozarslan 1 , Hanım Karahan 1 1 Dicle University Faculty of Medicine, Department of Biochemistry, Diyarbakır, Türkiye 2 Dicle University Faculty of Medicine, Department of Pediatrics, Diyarbakır, Türkiye ÖZET Amaç: Koagülasyon bilindiği üzere bir dizi zimojenin ak- tivasyon serisinden oluşur. Her basamakta öncül molekül bir veya daha fazla peptit bağının kopmasıyla aktif prote- aza dönüşür. Bu çalışmanın amacı in vitro farklı durumlar- da pıhtılaşma sırasında amino asit proflini araştırmaktır. Yöntem: Sağlıklı yetişkinlerden ve fenilketonürili çocuk- lardan alınan örnekler serum, ETA’lı plazma ve sitratlı plazma olarak ayrıldı. Örneklerin aminoasit analizleri ters faz HPLC kolonuyla yapıldı. Bulgular: EDTA’lı ve sitratlı plazmalar arasında anlamlı bir fark görülmedi (p>0.05). Serum aspartat (asp), gluta- mate (glu), serin (ser), histidin (his) ve fenilalanin (phe) seviyelerinde plazmaya göre anlamlı bir artış kaydedildi (p<0.05). Bu anlamlı artış fenilketonürili hastalarda göz- lenmedi. Sonuç: Sonuç olarak koagülasyon kaskadının enzimatik reaksiyonları sonucu bazı aminoasitlerin açığa çıktığını ve bu reaksiyonların uygun kimyasal mikroçevre içerisin- de gerçekleştiğini söyleyebiliriz. Bu mikroçevrenin rolü- nün ileri çalışmalarla aydınlatılmasına ihtiyaç vardır. Klin Den Ar Derg 2010; 1(3): 173-176 Anahtar kelimeler: Pıhtılaşma, amino asit, Fenilketonüri, vücut dışı ABSTRACT Objectives: The known model of blood coagulation in- volves a series of zymogen activation reaction sequenc- es. At each stage, a zymogen is converted to an active protease by cleavage of one or more peptide bonds in the precursor molecule. The aim of this study was to inves- tigate amino acid profles during coagulation process in different conditions in vitro. Methods: Samples of serum and plasma (treated by EDTA or citrate) were obtained from healthy donors and from patients with Phenylketonuria (PKU). Amino acid profles analyzed with reverse phase HPLC column. Results: There were no differences between two plasma amino acid levels which were obtained by EDTA and acid citrate (p>0.05). Serum aspartate (asp), glutamate (glu), serine (ser), histidine (his) and phenylalanine (phe) levels were signifcantly higher in serum than plasma (p<0.05). This signifcant difference was not observed in patients with PKU. Conclusion: As a result the enzymatic reactions of co- agulation process generate some aminoacids and these reactions take place in an appropriate chemical microen- vironment. This microenvironment can be used to clarify the stages of coagulation cascades with further studies. J Clin Exp Invest 2010; 1(3): 173-176 Key words: Coagulation, amino acids, Phenylketonuria, in vitro INTRODUCTION Blood coagulation is a complex physiological pro- cess which leads to the formation of fbrin clot through the proteolytic action of thrombin on fbrin- ogen. When blood is collected from the body and placed in a test tube, it clots quickly. The formation of thrombin generation during blood coagulation has become the most reliable approach to assess the global integrity of this complex process. Although all cellular and soluble plasma participants to this reaction have to be present to give the full picture of the physiology of this multifactorial reaction, in their natural whole blood environment 1 , in vitro conditions may give some important clues to this reaction.