Manglar 18(2): 193-199, 2021 DOI: http://dx.doi.org/10.17268/manglar.2021.026 Bacteria producing L-asparaginase isolated from Peruvian saline environments Bacterias productoras de L-asparaginasa aisladas de ambientes salinos peruanos Jeanett Montes; Pamela Elizabeth Canales * ; Juan Carlos Flores-Santos; Stephy Saavedra; Abad Hurtado- Gómez; Cynthia Esquerre-Huallpa; Amparo Iris Zavaleta Laboratorio de Biología Molecular, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Perú. * Corresponding author: pamela.canales@unmsm.edu.pe (P. E. Canales). ORCID ID of the authors J. Montes: https://orcid.org/0000-0003-0981-8274 P. E. Canales: https://orcid.org/0000-0001-6019-8846 J.C. Flores-Santos: https://orcid.org/0000-0001-5632-7203 S. Saavedra: https://orcid.org/0000-0002-4867-7622 A. Hurtado-Gómez: https://orcid.org/0000-0002-4278-243X C. Esquerre-Huallpa: https://orcid.org/0000-0002-2727-8884 A. I. Zavaleta: https://orcid.org/0000-0003-3844-7185 ABSTRACT L-asparaginase (EC 3.5.1.1) hydrolyzes L-asparagine in L-aspartic acid and ammonia. Its efficiency is subject to its kinetics and specificity on the substrate, characteristics that vary from one source to another. Thus, microorganisms from saline environments constitute a phylogenetic and metabolically heterogeneous group for the search of new enzymes. Therefore, the objective of this study was the phenotypic and genotypic characterization of bacteria with L-asparaginase activity isolated from Maras, Pilluana and Chilca salterns. The 24 evaluated bacteria were classified as 38% Gram-negative bacilli and 54% positive; and 8% Gram-positive cocci. The majority grew in 5% salt water, pH 7.0 and 37 °C, all assimilated glucose. Of the 24 bacteria that produced L-asparaginase in solid medium, enzymatic activity was determined in submerged cultures by the Nessler method in 14 of them. The CH11, M62, M64, M68, and P19 strains identified as Bacillus sp., by partial sequencing of the 16S ribosomal gene, presented higher L-asparaginase activity and instability due to the presence of proteases. Saline environments bacteria are potential sources for the prospective production of L- asparaginase to use them as a therapeutic agent and in the food industry. Keywords: L-asparaginase; saline environments; Bacillus; Enterobacter; Halomonas. RESUMEN L-asparaginasa (EC 3.5.1.1) hidroliza L-asparagina en ácido L-aspártico y amonio. Su eficiencia está supeditada a su cinética y especificidad sobre el sustrato, características que varían de una fuente a otra. Así, los microorganismos de ambientes salinos constituyen un grupo filogenético y metabólicamente heterogéneo para la búsqueda de nuevas enzimas. Por ello, el objetivo de este estudio fue la caracterización fenotípica y genotípica de bacterias con actividad L-asparaginasa aisladas de las Salinas de Maras, Pilluana y Chilca. Las 24 bacterias evaluadas fueron clasificadas como bacilos Gram negativos 38% y positivos (54%); y cocos Gram positivos (8%). La mayoría creció en agua de sales 5%, pH 7,0 y 37 °C, todas asimilaron glucosa. De las 24 bacterias productoras de L-asparaginasa en medio sólido, se determinó la actividad enzimática en cultivos sumergidos por el método de Nessler en 14 de ellas. Las cepas CH11, M62, M64, M68 y P19 identificadas como Bacillus sp., por secuenciamiento parcial de los genes ribosómicos 16S, presentaron mayor actividad L-asparaginasa e inestabilidad por presencia de proteasas. Estas bacterias de ambientes salinos son fuentes potenciales para la producción prospectiva de L-asparaginasa de uso como agente terapéutico y en la industria alimentaria. Palabras clave: L-asparaginasa; ambientes salinos; Bacillus; Enterobacter; Halomonas. Recibido: 02-04-2021. Aceptado: 10-05-2021. Esta obra está publicada bajo la licencia CC BY-NC 4.0