Biomédica 2011;31(sup.3):23-205 32 XX Congreso Latinoamericano de Parasitología Enfermedad de Chagas Biología molecular Respuesta celular (CD8 + ) antígeno específica frente a la infección por Trypanosoma cruzi Adriana Egui 1 , M. Carmen Thomas 1 , María Morell 1 , Concepción Marañón 1 , Bartolomé Carrilero 2 , Manuel Segovia 2 , Joaquín Gascón 3 , Concepción Puerta 4 , Manuel Carlos López 1 1 Instituto de Parasitología y Biomedicina López Neyra, Consejo Superior de Investigaciones Científicas, Granada, España 2 Hospital Virgen de la Arrixaca, Murcia, España 3 Centro de Investigación en Salud Internacional de Barcelona, Hospital Clinic de Barcelona, España 4 Departamento de Microbiología, Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, D.C., Colombia Introducción. Trypanosoma cruzi es el agente causante de la enfermedad de Chagas. Esta se inicia con una fase aguda que, en ausencia de tratamiento, deriva en una fase crónica asintomática caracterizada por la existencia de un equilibrio entre la respuesta inmune del huésped y la proliferación del parásito. Este equilibrio es sumamente frágil permitiendo la proliferación parasitaria en los tejidos y generando las patologías graves características de la fase crónica sintomática. A pesar de los avances realizados para establecer la dinámica de la respuesta inmune antiparasitaria durante la fase crónica de la enfermedad, este sigue siendo un importante objetivo por resolver. En el presente trabajo se identifican y caracterizan epítopos T CD8 + restringidos a HLA-A*0201 contenidos en las proteínas PFR2 y PFR3 de T. cruzi. Materiales y métodos. La expresión y localización de las proteínas PFR2/PFR3 se determina mediante Western blot e inmunofluorescencia indirecta. La afinidad de unión de los péptidos HLA-A*0201 contenidos en PFR2/PFR3 es evaluada sobre células T2. El reconocimiento de los péptidos por células mononucleares de sangre periférica de pacientes de Chagas se realiza mediante detección de Granzima B (ELISPOT) y de diferentes citocinas (Multiplex). El reconocimiento restringido a células T-CD8 + se demostró estimulando con células K562- A2 cargadas de péptido. Resultados. En modelos de inmunización en ratón y en células mononucleares de sangre periférica de pacientes de Chagas se observó el reconocimiento de 6 epítopos T-CD8 + (3/PFR2 y 3/PFR3). Cinco de estos péptidos inducen la presencia de linfocitos T citotóxicos antígeno-específicos secretores de Granzima B, únicamente en los pacientes en fase indeterminada de la enfermedad. En pacientes en fase crónica cardiaca sólo es detectada la secreción de citocinas Tc1 (IFNγ y TNFα) e IL6. Conclusiones. Las proteínas PFR2 y PFR3 contienen epítopos T CD8 + inmunodominantes procesados y presentados durante la enfermedad de Chagas, con un reconocimiento funcionalmente diferencial dependiendo del estadio de la enfermedad. Financiación. P08-CVI-04037;RD06/0021/0014- ISCIII-RETIC-MICINN (España) y FEDER. Implicancia de la persistencia de Trypanosoma cruzi en la miocardiopatía crónica por enfermedad de Chagas Carolina Bazán, Lorena Micucci, Romina Fauro, Fernanda Triquel, David Cremonezzi, Silvina Lo Presti, Alejandra Baez, Mariana Strauss, Patricia Paglini-Oliva, H. Walter Rivarola Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Córdoba, y Universidad Nacional de La Rioja, Argentina Introducción. Los mecanismos por los cuales los pacientes con infección crónica desarrollan la enfermedad de Chagas no son completamente conocidos. Se ha planteado la posibilidad de una patogenia autoinmune, aunque existen dudas de que el mecanismo autorreactivo sea el único responsable de las lesiones cardíacas. Para otros, la persistencia del parásito generaría una reacción inflamatoria crónica, y ésta induciría una respuesta inmune cuyo blanco sería el propio tejido del huésped. Estudiamos la importancia de la persistencia del parásito como factor determinante en generar miocardiopatía. Materiales y métodos. Se infectaron 139 ratones albinos suizos con 50 tripomastigotes por ratón de Trypanosoma Cruzi, cepa Tulahuen, y se les practicaron electrocardiogramas y se determinó parasitemia, supervivencia, histopatología, inmuno- fluorescencia y PCR a los 90, 180, 270 y 360 días • • •