J.Agric.Chem. and Biotech.,Mansoura Univ.,Vol. 3 (1): 19 - 28, 2012 CLONING OF MUTACIN GENE FROM Streptococcus mutans AND ITS PROTEIN EXPRESSION USING pT 7 -HIS PLASMID Al-Homsi, L. 1 ; S. Al-Okla 2 and A. Q. Abbady 3* 1 Biotechnology Dept., Fac. Agric., Damascus University, Syria. 2 Animal Biology Dept., Fac. of Science, Damascus University, Syria. 3 Department of Molecular Biology and Biotechnology, Atomic Energy Commission of Syria (AECS), Damascus, Syria. * Corresponding author. E-mail: abdabady@gmail.com Tel.: +963 11 213580; fax: +963 11 6112289. يييليييد نس ن ثيييةتلسيييثيييس نبيييد ااتو ثة تنسيييSreptococcus mutans سالزثتخسنم ن عنهل السنةتا نات ةنpT 7 -His حثصس نث 1 لدلس ن ، س 2 ة عالسيلس عاس ن 3 * 1 د سثشقنعد، جلثزد ند، كلةحد نلنت قسم ن 2 ةنح نلح قسم علم ند سثشقةم، جلثلد ند، كل ن 3 دسةد نذلقد نئد ند، هةحد نلنتد ةنئجزل نةجةا قسم ن  :ةنكتس نللا abdabady@gmail.com  ن ثلخص لطافرةة ا العقدStreptococcus mutans ةغرام ول هوائة موجبة الة سبحا كرو خل ه ة، توجد بشكل عام فار اختلى إنتاج نوع خاصو قدرتها عزها هم مان أهمسان، ملن الفموي لف التجو ةكروبدات الملمضا من اBacteriocins نوتاسة تسمى المدة الببتسلسلرة ال قصMutacin ثبط . ذلك بعض سالبوجبة الغرام وكات مرد من البكتفرة والعدلطات اا أخرى من العقد نمو أنواعنوتاس الم ة م نظام لنتاجذه الدراسة إلى تصم هعة، فقد هدفنا فجه المرتفه وتكلفة إنتا علحصول الغرام. نظرا لصعوبة ال ر والتعبلهارة خاص ثم تنس بلمد بتفاعللببت المرمزة لء المورثة بناة تتضمنبن بطرائق تؤشوتاسد الم ببت دبلزمستخدام ال عنها، باpT 7 -His ، كجزء من معقدةلتنق لة وقابللنحلة واللنتاج ا ضخم عالن بروت ة.لونئصه الل خصاكشف من خل وال مرة المتراكببل الق تفاعلن عن طروتاسلمدي المرمز لوتنكل السلتسلء ال تم بناOverlap PCR لمورثة إضافة إلمل طول ا مجتمعة كاث تغط متتامة، بحاتت نهالة ذام بادئات طوستخدا بان ى بادئت دبلزم من المورثة وال كل بعد ذلكلدنا، قطعذه الشدفة من ام هن لتضخرت قصpT7-His د التقمات بؤنز لةر سلن ثم تحو لربطهما وم ً دالمناسبة تمه اE. coli عملئج هذا ال نتاة الربط، لقد أعطت بنتائج عمل ن موتاسد الم قادرة على إنتاج ببتةجابعمرات إ مست بصورةخضر المإشبور المتفلن ال بالبروت ً رتبطا ( المإشبنة هذا المعقد البروت تنق. أمكنتوبلزمة ضمن الس منحل63 اتوغرافلكروماستخدام ا با)ودالتونل ك دلم الكرى جل عللكهربائفصل ا أوضحه ال كماذب المعدنلتجا ذات ا(SDS-PAGE) بعد صبغها. المرنا فن علتع سختبارن ثم ان من هذا المعقد وموتاسر الم الظروف لتحرختبار أفضللحقة ا ال احل رة منات كبر كملنظام توفر هذا اح تطوتة. سر البكتلتسلد من الة العدوتضادي على حره ال تؤث ف.ري واسع الط كمضاد بكت ً اة دراسة استخدامه مستقبلن بغوتاسر الم عقا ت اكلما ال لمفتاحية: المورثي،تنسيلسين، اللميوتافرة، الطا العقدية اpT 7 -His ني. ، التعبير البروتي سثدث ن قةء الدقالحت مضادة لداا ببترد من البكت تنتج العدAntimicrobial peptides هاطلق علُ نوسر اسم البكتBacteriocin مجموعةن هوسر البكت ، إحدى مجموعاتLantibiotic ة علىلحاو ا نونلنت الLanthionin ، ئتها ب الموجودة فلمنافسةدة بهدف كبح النواع اا عار البكتث تنتجها ح( Jack et al., 1995 ) ةخلو التهاق أغشق تمزا عن طرر البكتى قتل قدرتها علدات فذه الببتة عمل ه . تكمن آل