\  Developmental and Comparative Immunology. Vol. 13. pp 113-121. 1989 0145-305X/89 $300 + 00   Printed in the USA All rights reserved. Copyright © 1989 Maxwell Pergamon Macmillan pic   SUGAR SPECIFIC CELLULAR LECTINS OF PHALLUSIA MAMILLATA HEMOCYTES: PURIFICATION, CHARACTERIZATION AND EVIDENCE FOR CELL SURFACE LOCALIZATION Nicolo Parrinello and Vincenzo Arizza  Institute of Zoology. University of Palermo, via Archirafi 1B, 90123 Palermo, Italy  (Submitted June /988; Accepted December /988) OAbstract-CeJlular lectins (CLs) of Phallus in mamillata were demonstrated in protein prepa- rations obtained by salt fractionation from he- mocytes sonicated in a suitable medium. Since  the lectins from the precipitated fraction bind  sugars containing D-galactosyl groups, they  were purified by affmity chromatography on  Sepharose. SDS-PAGE under reducing condi- tions showed that CLs are formed of two com- ponents of apparent MWs approximately  36,900 and 35,090 and thus differ from serum  lectins (SLs) (MW about 62,2(}O). The  "shrinkage" observed when SLs were exam- ined under nonreducing conditions suggest the  presence of intrachain disulpbide bonds which  can affect the molecular structure of the SLs.  CL-SL differences were also revealed by the  nonidentity reaction of the immuno-precipitate  in immunodiffusion using 'an anti-SL immune  serum. The capacity of   found on hemocyte surfaces in some  species (11,13,14,15). The plasma of  tunicates contains lectins characterized  by binding of specific sites to substances  such as sialic acid and, more frequently,  D-galactosyl residues. Lectins have  been detected by their capacity to aggJu- tinate untreated and enzyme-treated  vertebrate erythrocytes and so far their  biological role has not been determined.  We recently reported that D-galactose  specific lectins of Ascidia malaca can be  found both free in the serum and present  on hemocyte surface (4,16). This finding  suggests that lee tins on cell surfaces  might act as receptors which can bind di- rectly with surface sugars on foreign  particles or identify self-markers on cell  settes or clumps with erytbrocytes  ....    strated that they possess Cl-Iactose specific 'Ct.s; .. >  recognItIon In Invertebrates   on their surfaces.  OKeywords- Tunicates; Hemocytes; Lectins.  Introduction  Invertebrate lectins are sagar specific  glycoproteins which are present in the  hemolymph of all the examined species  and, in many cases, possess opsonic  functions (1-12). Lectins have also been  Requests for reprints should be addressed to  Professor Nicolo Parrinello, Istituto di Zoo- logia, Via Archirafi, 1890123 Palermo. Italy.  This investigation was supported by grants  from the Italian M.P.I. (40%. 1987) and  C.N.R. (87.01649.04).  has"been attributed to molecular mecha- nisms based on protein-carbohydrate in- teractions at·cell surface levels (1,11,17- 21). It is known that invertebrates lack  immunoglobulins and their self nonself  recognition systems differ from those of  vertebrates inasmuch as they cannot be  defined in terms of specific antibody-an- tigen complementarity (1,22). However.  lectins are common to both inverte- brates and vertebrates, having also been  identified in several vertebrate tissues  (23,24).  Since evolutionary relationships be- tween invertebrate and vertebrate  lectins remain an open question. studies  of tunicates. considered to be the ances- tral chordates (25), might yield informa- tion on homologs or functional analogs  113  ....   .;," ..  :0::::  .;:!'. ,