576 Arh.farm. 2012;62: 576 – 586 Stručni radovi/Professional papers Priprema biološkog materijala i validacija bioanalitičkih HPLC metoda za ispitivanje lekova i njihovih metabolita Ana Protić 1* , Biljana Otašević 1 , Jelena Golubović 1 , Mira Zečević 1 , Ljiljana Živanović 1 , Jelena Vekić 2 , Aleksandra Zeljković 2 1 Univerzitet u Beogradu – Farmaceutski fakultet, Katedra za analitiku lekova, Vojvode Stepe 450, 11 152 Beograd, Srbija 2 Univerzitet u Beogradu – Farmaceutski fakultet, Katedra za medicinsku biohemiju, Vojvode Stepe 450, 11 152 Beograd, Srbija *Autor za korespondenciju: e-mail: anna@pharmacy.bg.ac.rs Kratak sadržaj Priprema biološkog materijala pre HPLC analize predstavlja kompleksnu proceduru koja je obično izvor velike varijabilnosti dobijenih analitičkih rezultata. Najčešće analizirane telesne tečnosti jesu plazma, serum, urin i saliva, i poželjno je primeniti što jednostavniju proceduru pri pripremi navedenih uzoraka. Kompleksnost i varijabilnost sastava biološkog materijala predstavlja jedan od glavnih problema u razvoju bioanalitičkih metoda. Plazma i urin sadrže veliki broj endogenih komponenata prisutnih u koncentracijama koje su obično veće od koncentacije samog leka i/ili njegovih metabolita. Osim što se lekovi i/ili njihovi metaboliti često nalaze u malim koncentracijama, njihova struktura može biti slična strukturi nekih endogenih komponenata. Imajući ovo u vidu, prečišćavanje i koncentrisanje biološkog materijala je jedan od najvažnijih koraka u razvoju bioanalitičke metode. Bez obzira sa kojim se uzorcima biološkog materijala radi, važno je voditi računa da se tokom analize dobiju pouzdani i ponovljivi rezultati. Validacija bioanalitičkih hromatografskih metoda izvodi se prema preporukama The International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use (ICH) regulative, Food and Drug Administration (FDA) i European Medicines Agency (EMA). U okviru postupka validacije ispituje se selektivnost, donja granica detekcije (LD), donja granica određivanja (eng. lower limits of quantification, LLOQ), opseg, linearnost, preciznost, tačnost, stabilnost i efikasnost postupka prečišćavanja uzoraka biološkog materijala. Ključne reči: prikupljanje uzoraka biološkog materijala, priprema uzoraka biološkog materijala za HPLC analizu, validacija bioanalitičkih HPLC metoda brought to you by CO w metadata, citation and similar papers at core.ac.uk provided by FarFar - Repository of the Faculty of Pharmacy, University of Bel