3 Ciência Animal 22(3):03-16, 2012 CONGELAÇÃO LENTA DE TECIDO OVARIANO OVINO UTILIZANDO 1,2- PROPANODIOL (PROH) SEGUIDA DE INCUBAÇÃO DE CURTA DURAÇÃO (Sheep ovarian tissue slow freezing using 1,2-propanediol (PROH) as cryoprotectant followed by short-term in vitro culture) Raphael Fernando Braga GONÇALVES 1* , Franciele Osmarini LUNARDI 1 , Anelise Maria Costa Vasconcelos ALVES 1 , Valdevane Rocha ARAÚJO 1 , José Ricardo de FIGUEIREDO 1 , Cláudio Cabral CAMPELLO 1 , Ana Paula Ribeiro RODRIGUES 1 1. Universidade Estadual do Ceará, Faculdade de Veterinária, Laboratório de Manipulação de Oócitos e Folículos Ovarianos Pré-antrais (LAMOFOPA) RESUMO A criopreservação de tecido ovariano tem como principal objetivo, a manutenção deste tecido para sua posterior utilização, garantindo a preservação do material biológico de fêmeas de animais de alto valor genético. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivos definir protocolo ótimo para criopreservação de tecido ovariano ovino utilizando PROH como agente crioprotetor e avaliar a resposta do tecido criopreservado incubado in vitro por curtos períodos. Para tanto, o tecido ovariano foi exposto (5, 10 ou 20 minutos) e/ou congelado utilizando PROH em duas diferentes concentrações (1,0 ou 1,5M). Em seguida, após a definição do protocolo mais adequado, realizou- se a incubação deste tecido por 2 ou 4 horas. Em ambas as etapas, o tecido ovariano foi avaliado por Histologia Clássica ou viabilidade por inclusão em Azul de Tripan. Verificou-se que a exposição por 5 minutos seguida de criopresevação do tecido em solução de 1,5 M de PROH garantiu percentual de folículos viáveis significativamente semelhantes ao tecido fresco (P<0,05). Em seguida, o tecido congelado nessas condições foi cultivado por 2 ou 4 horas. Tal procedimento demonstrou que, com o decorrer do cultivo, os folículos sofrem perda gradual de sua normalidade morfológica em comparação ao tecido fresco, o que foi confirmado pela análise de viabilidade (P<0,05). Assim, o presente trabalho conclui que é possível congelar eficientemente o tecido ovariano ovino utilizando 1,5 M de PROH e exposição por 5 minutos e, que ocorre uma redução gradual na qualidade folicular do tecido criopreservado e submetido a curtos períodos de incubação. Palavras-chave: Criopreservação, Cultivo in vitro, PROH, Tecido ovariano, Ovinos ABSTRACT Ovarian tissue cryopreservation aims to maintain the tissue for later use, ensuring the preservation of biologic material from women and high genetic valuable animals. In this context, this work aimed to define an optimum sheep ovarian tissue cryopreservation protocol using PROH as crioprotectant and to evaluate the responsiveness of cryopreservated tissue to a short-term in vitro culture. Then, the ovarian tisse was exposed (5, 10 or 30 minutes) and/or cryopreservated using PROH (1,0 or 1,5M). After the definition of the most appropriate protocol, the tissue was cultures Ciência Animal 22(3):03-16, 2012 * Endereço para correspondência: Endereço: Rua Central, nº 322, Cajazeiras, Fortaleza- Ce, Telefones: (85) 9199-2348 raphaelfbg@gmail.com